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目的:对新疆黑果小檗果实进行化学成分预试验、成分分离、HPLC-UV指纹图谱方法建立、总黄酮含量测定及超声工艺优化等初步分析,并初步研究乙醇粗提物抑菌抗氧化活性部位。方法:1.黑果小檗果实化学成分初步分析:化学反应法定性鉴别黑果小檗果实不同溶剂提取物中化学成分;CC、TLC等方法分离果实醇提物中化学成分,根据理化性质和1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定;初步建立黑果小檗果实HPLC-UV指纹图谱方法,优化色谱条件并进行方法学考察;亚硝酸钠显色法测定不同溶剂提取物中总黄酮含量;Plackett-Burman设计和响应面法优化黑果小檗果实总黄酮超声提取工艺。2.抑菌活性部位研究:采用牛津杯法、倍比稀释法和生长曲线法评价黑果小檗果实超声及回流醇提物及相应石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取部位的抑菌活性。3.抗氧化活性部位研究:通过测定总还原力比较提取方法对抗氧化活性的影响,选择活性较好的提取方法制备黑果小檗果实醇提物及萃取部位进行DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基以及亚硝基自由基清除试验,绘制清除率曲线,计算IC50,评价其抗氧化活性。结果:1.黑果小檗果实化学成分初步分析:化学反应定性鉴别知黑果小檗果实中可能含有糖及其苷类、有机酸、酚类、黄酮、油脂、不饱和三萜和甾醇类等成分;从黑果小檗果实醇提物中分离得到2(R)-羟基丁二酸-1-甲酯和3,4-二羟基苯甲酸(原儿茶酸)两个化合物;初步建立了新疆黑果小檗果实HPLC-UV指纹图谱方法,确立色谱条件为:色谱柱为Agilent C18柱;柱温为30℃;流速为1mL/min;进样量为10μL;检测波长为254nm;流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱顺序为0min(94%B)-25min(88%B)-40min(79%B)-55min(68%B)-60min(94%B);不同溶剂提取物中丙酮、乙醇、水提取物总黄酮含量较高,分别为9.43%、6.13%、4.85%;总黄酮超声提取最优工艺为64%乙醇、料液比1∶29、提取32min,超声功率350W,提取3次,经过3次平行验证试验得实际总黄酮得率为6.213%,占预测值的1.03%。2.抑菌活性部位研究:黑果小檗果实超声醇提物抑菌活性优于回流方法,其乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的MIC均为6.25mg/mL,正丁醇部位对金黄色葡萄球菌的MIC为6.25mg/mL;醇提物对青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌增殖作用及抑制作用均较小。3.抗氧化活性部位研究:总还原能力测定显示提取方法对抗氧化活性的影响不具有统计学意义,回流醇提物中总还原能力大小顺序为:乙酸乙酯部位>二氯甲烷部位>正丁醇部位>石油醚部位>水部位;DPPH清除能力的大小顺序为:维生素C>二氯甲烷部位>乙酸乙酯部位>正丁醇部位>水部位>石油醚部位,IC50分别为0.012mg/mL、0.066mg/mL、0.101mg/mL、0.153mg/mL、0.195mg/mL、0.246mg/mL;羟自由基清除能力的大小顺序为:维生素C>乙酸乙酯部位>正丁醇部位>二氯甲烷部位>石油醚部位>水部位,IC50分别为0.199mg/mL、0.380mg/mL、1.120mg/mL、1.159mg/mL、1.977mg/mL、2.216mg/mL;亚硝基自由基清除试验样品浓度达到10mg/mL时,清除率仍未达到50%,超氧阴离子自由基清除试验中样品浓度多次调整,清除率均为负值,因此两个试验均未计算IC50。结论:1.首次对黑果小檗果实的化学成分做了系统的初步分析,2个单体化合物均为首次从黑果小檗果实中分离得到,建立的HPLC-UV指纹图谱方法,可为黑果小檗果实指纹图谱的建立提供方法基础。通过PLackett-Burman设计和响应面法优化总黄酮超声提取工艺,简单可靠。2.黑果小檗果实超声醇提物乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果较敏感。3.黑果小檗果实醇提物总还原能力、DPPH及羟自由基清除能力较强,超氧阴离子自由基、亚硝基自由基清除能力弱,其中乙酸乙酯部位、二氯甲烷部位及正丁醇部位为主要抗氧化活性部位。