PKMS/PDDA界面上的细胞传感及其表面糖蛋白检测研究

来源 :南京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbdzj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞电化学传感器由于不仅能够实现对分析物快速、灵敏的检测而且能够实现对分析物实时、动态的监测,已成为分析化学的一大热点领域。在其发展过程中,构建高选择性、高灵敏度以及较长使用寿命的细胞传感器一直是我们的目标。其中在电极表面构建各种不仅能有效固定细胞而且能很好的保持固定细胞活性的生物相容性的膜是实现这一目标的前提。酶联免疫技术与细胞传感技术的结合,可简单实现细胞表面物质如糖蛋白、醣类化合物等的检测,这更进一步推动了细胞电化学传感器的发展。然而,在电化学免疫分析中,膜对抗体的非特异性吸附是影响检测灵敏度的一个不可忽略的因素。这就又对生物相容性膜的构建提出了新的要求,即具有较强的抗非特异性吸附的能力。本文以有利于细胞固定及有效抑制P-糖蛋白非特异性吸附的生物相容性界面的构建为中心,开展了以下两个方面的研究工作:   ㈠基于生物兼容性的PDMS-PDDA复合膜的细胞传感器。通过简单的物理方法构建了一种生物相容性的界面,该界面不仅能有效的捕获人类胃癌细胞(BGC823细胞)而且能有效维持粘附在其上的细胞的活性。基于此,结合免疫方法,我们灵敏的检测了BGC823细胞的数目。该膜制备简单、花费少,仅采用旋涂的方法将掺杂了聚二烯丙基二甲基胺(PDDA)的聚二甲基硅氧烷(PDMS)薄膜(PDMS-PDDA)修饰到金电极上。通过细胞培养实验和电化学实验分别验证了该复合膜的生物兼容性及电化学探针[Fe(CN)6]3-/4-的传输能力。相比于纯的PDMS薄膜和掺杂了聚苯乙烯磺酸钠(PSS)的PDMS复合膜,PDMS-PDDA复合膜由于PDDA所带正电荷和细胞表面多糖类物质所带负电荷的相互作用展示了显著的捕获细胞的能力。由于采用了能生成生物沉淀的免疫反应来放大检测信号,我们用示差脉冲伏安法检测了细胞数量和监测了其在界面上的粘附、增殖和编程性死亡等生长状态。与交流阻抗法相比该方法快速、对细胞在表面的状态影响小。在最优条件下,细胞浓度的检测范围是1.0×103-5.0×107 cells mL-1,最低检测限为7.2×102cells mL-1。   ㈡基于PDMs-PDDA复合膜的细胞表面糖蛋白的检测。PDMS-PDDA复合膜除具有良好的生物兼容性外,还展示了有效的抑制BSA、P-糖蛋白抗体及其二抗的非特异性吸附能力。通过电化学实验验证了该膜良好的抑制非特异性吸附的能力。基于该性质,我们结合一步免疫反应的紫外可见光谱法检测了BGC823细胞表面的糖蛋白,每个单细胞表面的P-糖蛋白的分子数约为4.7×107。结果表明该复合膜在评估活细胞表面的糖蛋白方面具有潜在的应用价值。
其他文献
氧化亚铜是一种重要的无机化工原料,在涂料、玻璃、陶瓷、塑料、农业以及工业催化等领域有广泛的用途。由于粒子的物理性质、化学性质与其形貌和粒径大小有密切关系,因此可控制
近年来,药物超分子化学发展迅速,它是超分子化学在药学领域的新发展,已经成为超分子化学研究的热点之一。这是因为药物超分子具有许多优点,主要包括良好的稳定性、较高的安全性、
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
众所周知,以综合材料为表现手段的绘画作品早而有之,而且是20世纪现代艺术潮流的重要组成部分。人类历史跨入21世纪,由于科学技术的飞速发展和社会生活的激烈变化,文化活动出
沸石作为一种多孔材料因其高吸附性、高选择性而在水处理、空气净化、放射性废料处理等领域得到广泛的应用。同时由于孔道内补偿电荷的高流动性,沸石的介电(电)性质也逐渐进入
采用密度泛函理论(DFT)方法在B3LYP/6-31+G(d,p)水平上对聚甲醛二甲基醚(PODE)系列化合物进行了全优化和振动分析计算,获得了该系列化合物的最优构型及热力学函数值。通过设计
《中共中央关于加强和改进党的作风建设的决定》,以党的基本理论和基本路线为指导 ,贯彻江泽民同志在庆祝中国共产党成立八十周年大会上的重要讲话精神 ,科学地分析了我们党
马克思曾经指出:“人是各种社会关系的总和,每个人都不是孤立存在的,如何理顺好这些关系、如何提高生活质量就涉及到了社交能力的问题。”由此可见,人作为社会存在的个体,具有社会群居性和主动交往性等特征,生活、学习、工作,都离不开相互之间的交流、沟通和协作。现实社会中,有些人在社会上“如鱼得水”,有的人却“寸步难行”。这在一定程度上反映了具有良好交往沟通能力的重要性。学生在学习实践的进程中,作为班级集体的
近年来,作为有机光电子器件的重要组成部分的有机发光二极管、有机场效应晶体管和有机发光场效应晶体管取得了很大的发展。本论文围绕有机光电器件的界面问题,开展了有机发光二
学位
能源是支撑人类文明进步的物质基础,是现代社会发展不可或缺的基本条件。作为人类生存和发展的重要物质基础,煤炭、石油、天然气等化石能源支撑了19世纪到20世纪近200年来人类文明的进步和经济社会发展。然而,化石能源的不可再生性和人类对其的巨大消耗,使化石能源正在逐渐走向枯竭;从另一方面来看,由于化石能源的使用过程中会新增大量温室气体CO2,同时也产生了一些有污染的烟气,威胁全球生态。因而,开发更清洁的