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近年来,PPCPs作为一种新型污染物,其污染状况和对环境中非靶生物的毒性和健康危害受到人们的广泛关注。PPCPs的来源主要是城市生活污水,医药行业废水和畜禽水产养殖业废水。现行的污水处理工艺还不能够有效地去除这些医药活性物质,大多数PPCPs物质以不完全转化的形式随着出水进入到河流生态系统,通过污泥和人畜粪便堆肥进入到土壤环境当中,形成了持续累积的污染状况。 随着人口的急剧增长和畜禽水产养殖业的发展,抗生素在预防和治疗疾病,促进畜禽的生长和繁殖以及提高饲料利用率等方面被广泛的应用。研究报道抗生素进入人和动物体内,经代谢转化,有很大一部分随着粪便和尿液排出体外,并随着有机肥的施用和污水灌溉等形式进入到土壤生态系统中,造成了土壤当中抗生素的浓度长期维持在相对稳定的水平,形成了一种伪持久性的污染。 四环素类抗生素是目前全球使用最广泛的抗生素之一,为了探究抗生素在土壤生态系统中的致毒机理,我们以土霉素作为四环素类抗生素的代表,对赤子爱生蚯蚓在500mg/kg土霉素胁迫下7天,14天和21天后基因翻译和表达水平的变化进行了研究。实验建立了赤子爱胜蚓的总蛋白提取的方法,有助于双向电泳技术的分离,差异表达的蛋白点采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱,通过肽质量指纹法(PMF)和串联质谱法进行了鉴定。共有30个蛋白质被鉴定出来,按照功能可将其分为四大类。鉴定结果表明,约有一半以上的蛋白属于Actin蛋白家族,而且几乎所有的Actin蛋白表达抑制在两倍以上。同时,我们还发现一种具有纤维蛋白溶解酶原激活物活性的溶纤维蛋白酶在暴露7天后,显著下调。实时荧光定量PCR结果显示,actin基因的转录水平变化与蛋白质表达水平并不一致。 由于蚯蚓的基因组序列并未完全测定,缺乏完善的蛋白质数据库信息,但我们的研究能够为以后研究抗生素及其他PPCPs对土壤生态系统中非靶生物的的毒性作用机理,寻找更为稳定和敏感的蛋白质组水平的生物标志物奠定了基础。