论文部分内容阅读
目的:肠外营养(Parenteral nutrition PN)为无法进行肠内营养的患者提供了生命支持,但肠外营养时存在肠道损伤,主要为肠道菌群改变、肠道粘膜促炎症状态和继发性的肠道屏障功能下降。目前研究认为这些肠道损伤与肠外营养并发的肠道细菌移位、肝脏损伤密切相关。肠外营养相关的肠道损伤的具体发生机制仍在进一步研究中。本实验通过检测紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、claudinl)、NOD2及其相关信号分子:NF-κB p65、phospho-NF-KB p65(p-p65)、p38MAPK(p38)、p-p38、ERK、p-ERK、ERBIN(ErbB2/Her2 interacting protein ErbB2/Her2相互作用蛋白)在肠外营养组和生理盐水组大鼠的小肠组织中的表达情况,以此来研究肠外营养所致肠道损伤的相关机制,为预防和治疗肠外营养相关并发症提供新思路。方法:选择12只SPF级雄性SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)和肠外营养组(PN组)。每只大鼠经颈静脉置管后进食进水两天。第三天NS组给予输注生理盐水,同时进水进食,PN组给予输注营养液(配方表见表1),并禁食禁水。输液一周后,处死大鼠,取出小肠。首先在光镜下观察两组小肠粘膜厚度及绒毛高度,并用western blot方法检测两组小肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、claudinl、occludin的表达情况。然后,用 western blot 检测 NOD2 及其相关分子 NF-κB p65、p-p65、p38、p-p38、ERK、p-ERK以及ERBIN的表达水平,并用免疫组化的方法检测两组小肠组织中p-p65的表达水平。结果:1.与NS组相比,PN组小肠粘膜萎缩,小肠绒毛高度下降(P=0.004,P=0.007),肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达水平下降(P<0.01,P<0.01)。肠道claudinl表达水平变化无统计学意义(?>0.05)。2.与NS组相比,PN组NOD2的表达水平上升(P=0.003),NF-κB p65表达水平、活化水平(p-p65:p65)升高,有统计学意义(P=0.01,P=0.046)。与NS组相比,PN组p38表达水平下降,有统计学意义(P=0.012),p38活化水平(p-p38:p38)升高,有统计学意义(P=0.046)。肠道ERK、ERK活化水平(p-ERK:ERK)、ERBIN表达水平变化无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示:与NS组相比,PN组p-p65升高,有统计学意义(P=0.048)。结论:1.肠外营养可引起大鼠小肠粘膜萎缩,紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达水平下降,肠道紧密连接受损。2.肠外营养可引起大鼠小肠组织NOD2表达水平升高,NF-κB p65、p38活化水平升高。