拟南芥避荫反应相关基因SAV4在生长素运输中的功能初步研究

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植物激素生长素参与调控植物生长发育的各个阶段。通过生长素极性运输形成和维持的生长素浓度梯度影响植物组织和器官的生长及分化。目前的研究表明,拟南芥的避荫反应和向性反应都与生长素的运输和分布有关。在之前的研究中,本实验室鉴定了一株表现避荫反应缺陷表型的突变体sav4(shade avoidance 4),实验证明SAV4定位在细胞膜向芽侧和细胞核中,影响生长素的极性运输。在本论文中,我们对SAV4的定位和在生长素运输中的功能展开研究。首先,我们发现删除SAV4蛋白预测的N端和C端的核定位信号序列不会改变其细胞核定位。有趣的是,C端核定位信号序列缺失的SAV4不能恢复遮荫条件下sav4下胚轴短的表型,且蛋白膜极性定位改变,表明C端598-631氨基酸序列对SAV4的细胞膜极性定位和功能十分重要。此外,我们通过实验证明SAV4蛋白发生了棕榈酰化修饰,突变N端预测的棕榈酰化位点对SAV4的亚细胞定位和遮荫下的功能没有显著影响。其次,我们通过体外Pulldown和烟草BiFC实验证明SAV4能够与ABCB1 C端直接相互作用,SAV4突变后不影响ABCB1的细胞膜定位,ABCB1、ABCB19突变同样不影响SAV4的定位。令人意外的是SAV4能够恢复abcb19遮荫下下胚轴不能正常伸长的表型,这暗示着SAV4可能参与遮荫下ABCB19调控拟南芥下胚轴伸长的信号通路,且位于ABCB19下游。最后,我们对黑暗条件下sav4突变体强的负向重力表型与生长素水平的关系进行了初步研究。我们发现黑暗条件下sav4下胚轴中生长素水平的高低不直接影响其负向重力反应。
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