离子液体的固定化及其在蛋白质分离中的应用

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离子液体优良的物理和化学性质使其成为潜力巨大的功能性材料。近年来,离子液体作为有效的载体在分离富集中的应用受到了广泛的关注,但在常规的液-液萃取分离中,离子液体消耗量大,且分离效率较低,另外由于离子液体的黏度较大,使得萃取体系的相分离较为困难。离子液体的固定化能将离子液体的特性转移到固相载体上,利用固定化的离子液体作为分离富集的媒介则可以使操作大大简化,同时显著提高分离富集的效率。本文采用N-甲基咪唑和聚氯乙烯(PVC)树脂为原料,通过简单的化学反应,将N-甲基咪唑固载到PVC表面,制备固定化离子液体1-乙烯基-3-甲基咪唑氯代盐(PVC-mimCl),采用红外光谱、核磁共振光谱、Zeta电位分析等手段对所制备的固体材料进行结构表征。采用该固定化离子液体PVC-mimCl作为固相吸附材料,考察其对蛋白质的吸附性能,结果表明在酸性条件下该固定化离子液体对血红蛋白具有吸附选择性,据此建立了以PVC固定化离子液体为分离介质固相萃取分离血红蛋白的新方法。实验中考察了吸附时间、离子强度、洗脱剂及其浓度等分离参数对分离纯化效率的影响。在最优实验条件下,15mg该固定化离子液体对30μg mL-1血红蛋白的吸附效率为91%,采用浓度为1.0%的SDS溶液为洗脱剂,洗脱效率为75%,吸附容量为22.7μg mg-1。将该方法应用于人全血样品中血红蛋白的分离并对分离后的血红蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳测定,结果表明该方法可有效地实现对人全血样品中血红蛋白的分离,且分离出的血红蛋白纯度较高。
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