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目的:探讨微小RNA-378a-3p（miR-378a-3p）与糖酵解关键酶类的关系,以及miR-378a-3p对食管鳞癌细胞Eca-109凋亡及能量代谢的影响。方法:采用Eca-109食管鳞癌细胞系,分为空白对照组、阴性对照组和实验组（miR-378a-3p基因转染后24h组与48h组）。具体方法如下:1)以GV272为载体,使用PCR技术在体外对PKM进行扩增,构建GV272-PKM过表达载体;2)通过蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测miR-378a-3p干预后GAPDH、PGK-1、ENO1、PKM2、LDHA、GLUT1、HK2、PFKL、ALDOA等蛋白表达水平的变化;3)用ELISA实验验证miR-378a-3p转染后24小时组与48h组对ALDOA、GLUT1、HK2、PFKL、GAPDH、PGK-1、ENO1、PKM2、LDHA等糖酵解关键酶活性的影响。4)通过检测荧光素酶活性的方法验证miR-378a-3p的下游靶基因。5)用紫外分光光度法检测miR-378a-3p表达对能量代谢的影响（ATP产量）。6)miR-378a-3p表达对食管鳞癌细胞凋亡的影响。结果:1)成功构建了GV272-PKM过表达载体,测序结果提示序列构建与理论预测相一致;2)Western blot结果显示:与空白对照组与阴性对照组相比,转染miR-378a-3p后在24h和48h的HK2、ALDOA、PKM2与LDHA蛋白的表达水平降低（P<0.05）,过表达miR-378a-3p组在24h的GAPDH蛋白的表达量明显降低（P<0.01）;3)酶联免疫吸附法（Elisa法）结果显示,与空白对照组相比,食管鳞癌细胞Eca-109转染后24h对GLUT1、HK2、ENO1、PKM2、GAPDH、LDHA、PFKL等蛋白活性被抑制,其中,对HK2、GLUT1、ENO1蛋白活性明显被抑制,酶活性下降,（P<0.001）;4)GLUT-1、PKM2、ALDOA基因野生型在与miR-378a-3p共转染时,双荧光素酶报告基因活性显著被抑制,提示GLUT-1、PKM2、ALDOA可能是miR-378a-3p的下游靶基因;5)转染miR-378a-3p后用紫外分光光度法检测结果显示:ATP含量明显降低,代谢减少（P<0.01）;6)与空白对照组和阴性对照组相比,miR-378a-3p转染组在24h和48h时对食管鳞癌细胞Eca-109的凋亡率显著增高（P<0.001）。结论:通过验证确定GLUT-1、PKM2、ALDOA基因为miR-378a-3p的靶基因。miR-378a-3p通过降低糖酵解关键酶的表达来阻断食管癌细胞的能量代谢,从而增加细胞的凋亡。