论文部分内容阅读
目的:甲状腺乳头状癌术后患者长期服用超生理需要量的甲状腺素会产生主要针对心血管和骨骼的不良影响。长期促甲状腺激素抑制会使患者心率加快,频发的房性期前收缩。而绝经后妇女促甲状腺激素≤0.03m U/L,骨质疏松导致骨折的风险增加2倍[1]。甲状腺乳头状癌中约有10%的患者出现复发,其中只有一小部分会因复发而死亡,甲状腺乳头状癌患者的促甲状腺激素水平到底应该抑制到多少能够使患者受益还尚未有明确的研究可以说明。本研究旨在探讨不同浓度的促甲状腺激素对甲状腺乳头状癌生长的作用,为促甲状腺激素抑制的临床用药提供理论依据。方法:35只体重在79克直间的雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠按照完全随机化原则分为7组。取人乳头状甲状腺癌细胞系TPC-1,以1×106细胞数制成100ul细胞悬液接种于35只裸小鼠皮下,并分别给予不同浓度的TSH:对照组(0m U/L)、2m U/L、4m U/L、8m U/L、12m U/L、16m U/L、20m U/L。观察并测量各组瘤体大小,并用放射免疫分析法测定瘤体组织匀浆中甲状腺球蛋白(TG)的含量。结果:1甲状腺乳头状癌细胞的培养将培养瓶放于37℃,5%浓度的CO2的培养箱内培养。4-5d后,大量细胞贴壁。进入甲状腺乳头状癌细胞的潜伏期,期间细胞的伪足进一步伸长,细胞呈多角形,细胞核及细胞体积逐渐增大。5-7d后,细胞进入生长较快增殖期,细胞继续伸长且向四周生长,彼此连接,呈长梭形,几乎无圆形及椭圆形细胞,已贴满培养瓶底一半以上。7-8d后,于培养瓶中形成单层细胞。每天定时观察细胞生长情况,细胞生长密度大于90%,进行细胞的传代。在显微镜下计数并记录,然后制备成细胞悬液,每只小鼠注射细胞数为1×106个。2不同浓度的TSH组裸小鼠的生长状况TPC-1细胞颈背部皮下注射接种35只雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠,16天后均成瘤。所有裸小鼠均成活。移植瘤生长情况良好,35只裸小鼠在16天内生长状态良好,活动量与进食饮水量无明显异常。3不同浓度TSH组裸鼠瘤体体积大小的比较运用公式(体积=长×宽×宽÷2)计算出肿瘤的体积(单位:mm3),计量资料采用方差分析,最终结果用(均数±标准差)表示:1组:97.00±25.25、2组:209.70±96.91、3组:520.81±184.86、4组:1398.98±97.24、5组:2196.81±162.39、6组:2764.33±228.29、7组:3024.00±199.87。通过统计软件SPSS13.0,根据测定数据,P<0.05,说明各组之间有统计学意义。体积呈增大趋势。计算多个样本均数间的多重比较采用SNK-q检验,1组和2组差异无统计学意义,绘制折线图。测体积与TSH浓度分组的Pearson相关性R2=0.973,相关性良好且呈正相关。4不同浓度TSH组裸鼠瘤体组织匀浆甲状腺球蛋白浓度含量的比较经蛋白校正后,最终结果用(均数±标准差)表示,测出各组甲状腺球蛋白(TG)浓度含量(单位:ng/mgpro):1组:1.50±0.01、2组:1.50±0.02、3组:1.68±0.11、4组:1.91±0.10、5组:2.02±0.03、6组:2.15±0.05、7组:2.26±0.13.通过统计软件SPSS13.0,计量资料采用方差分析,计算多个样本的F检验,P<0.05,说明各组之间有统计学意义。TG呈增高趋势。计算多个样本均数间的多重比较采用SNK-q检验,1组和2组差异无统计学意义,绘制折线图。测TG与TSH浓度分组的Pearson相关性R2=0.956,相关性良好且呈正相关。结论:1 TSH可以提高构建甲状腺乳头状癌裸鼠模型的成功率。2 TSH对皮下接种甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1系)裸鼠的成瘤具有促进作用,随着TSH浓度的增加,肿瘤体积呈增大趋势。3 TSH对皮下接种甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1系)裸鼠的甲状腺球蛋白(TG)的分泌具有促进作用,随着TSH浓度的增加,TG浓度含量呈增高趋势。4 TG的浓度含量与肿瘤体积的大小呈正相关趋势。5动态观察TSH对裸鼠在体甲状腺乳头状癌肿瘤组织生长的作用,为临床上个体化TSH抑制治疗提供参考依据。