HSV-1 VP22和hIL-18作为HBV DNA疫苗分子佐剂的初步研究

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shijinya
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  由于DNA疫苗的免疫原性较弱,所以利用分子佐剂增强DNA疫苗的效果对新型DNA疫苗的开发具有重要价值。本文利用HSV-1VP22增强DNA疫苗免疫原性的特性以及IL-18刺激Th1细胞增殖并诱导DC细胞成熟的特点,研究其作为HBVDNA疫苗分子佐剂的作用。通过构建pcDNA3.1-S、pcDNA3.1-VP22-S、pcDNA3.1-S-IL18和pcDNA3.1-VP22-S-IL18,转染293细胞后,均能表达HBsAg。进一步采用壳聚糖制备DNA微球疫苗,经扫描电镜观察,微球表面光滑,直径约3-5μm。为了验证VP22是否具有胞间传递能力,构建了pVP22-EGFP-N2,与pEGFP-N2分别转染293细胞48h左右,荧光显微镜观察发现EGFP在细胞内均匀分布,且荧光很强;而VP22-EGFP主要分布在细胞质,且荧光较弱,同一个细胞表达的VP22-EGFP有倾向聚集的特点,提示VP22可能会促进与之融合蛋白聚集在细胞质,而且表达这两种蛋白的细胞数量并没有明显的不同。进一步流式细胞仪分析证实VP22没有胞间传递的作用。
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