HIFU治疗对儿童实体肿瘤机体免疫功能的影响及耐药情况的研究

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第一部分:HIFU治疗对儿童恶性实体肿瘤机体免疫功能的影响目的:通过检测高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound, HIFU)治疗前后恶性实体肿瘤患儿外周血体液免疫相关指标(IgG、IgA、IgE、IgM、C3及C4)及细胞免疫相关指标(T淋巴细胞转化率、IL-1β、IL-2及TNF-α)的变化情况,探讨HIFU治疗对恶性实体肿瘤患儿机体免疫功能的影响。方法:采用重庆海扶技术有限公司生产的JC200型聚焦超声肿瘤治疗系统,治疗儿童恶性实体肿瘤20例。分别在HIFU治疗前和治疗后1周、1月抽取患儿空腹外周静脉血6ml,采用速率散射比浊法检测血清IgG、IgA、IgM、C3及C4的表达量,酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血浆中IgE、IL-1β、IL-2及TNF-α的表达量,淋巴细胞转化试验检测外周血T淋巴细胞转化率情况。运用重复测量方差分析及秩和检验对各指标HIFU治疗前后多组间的差异进行统计学分析,同时对各时间点两两间进行LSD-t检验,比较各时间点两两间的差异是否具有统计学意义。结果:与HIFU前比较,HIFU后IgG与C3的表达量的差异具有统计学意义(重复测量方差分析,F=4.425, P=0.017与F=4.089, P=0.022);进一步进行各时间点组间两两比较,HIFU后1月IgG与C3的表达量显著增加,差异具有统计学意义(LSD-t检验,P=0.015与P=0.027);IgA、IgM、IgE和C4的表达量在HIFU治疗前后的差异均无统计学意义(重复测量方差分析,P>0.05)。与HIFU前比较,HIFU后IL-2与TNF-α的表达量的差异具有统计学意义(重复测量方差分析,F=4.196, P=0.021与秩和检验,P<0.001),进一步进行各时间点组间两两比较,HIFU后1月IL-2及TNF-α的表达量增加明显,差异具有统计学意义(LSD-t检验,P=0.021与P=0.028);与HIFU前比较,HIFU后T淋巴细胞转化率及IL-1β的表达量的差异无显著性(重复测量方差分析,F=2.489, P=0.092与F=0.310, P=0.735)。结论:HIFU治疗可能对恶性实体肿瘤患儿机体体液免疫功能有增强作用。HIFU治疗可能对恶性实体肿瘤患儿机体细胞免疫功能有增强作用。第二部分:HIFU治疗对儿童恶性实体肿瘤机体耐药情况的影响目的:通过检测高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)治疗前后恶性实体肿瘤患儿外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCS)表达多药耐药基因(Multi-drug resistance 1, MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(Multi-drug resistance-associated protein 1, MRP1)、肺耐药蛋白基因(Lung resistance protein, LRP)的变化情况,探讨HIFU治疗对恶性实体肿瘤患儿机体耐药情况的影响。方法:采用重庆海扶技术有限公司生产的JC200型聚焦超声肿瘤治疗系统,治疗儿童恶性实体肿瘤20例。分别在HIFU治疗前和治疗后1周、1月抽取患儿空腹外周静脉血2ml,应用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR, FQ-PCR)技术检测患儿外周血中MDR1、MRP1、LRP的mRNA表达量情况,运用重复测量方差分析及秩和检验对各指标HIFU治疗前后多组间的差异进行统计学分析,同时对各时间点两两间进行LSD-t检验,比较各时间点两两间的差异是否具有统计学意义。结果:与HIFU前比较,HIFU后MDR1、MRP1及LRP表达量的差异具有统计学意义(重复测量方差分析,F=4.038, P=0.025、F=11.015, P<0.001、F=5.477, P=0.008);进一步进行各时间点组间两两比较,HIFU后1周MDR1、MRP1与LRP的表达量显著降低(LSD-t检验,P=0.017、P=0.014、P=0.007);HIFU后1月MRP1与LRP的表达量也明显降低,差异具有统计学意义(LSD-t检验,P<0.001、P=0.006)。结论:HIFU治疗可能对恶性实体肿瘤患儿机体的耐药有逆转作用。
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