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目的：检测宫颈癌Caski细胞表面是否表达有功能的P2X7受体；探讨在Caski细胞上稳定高表达P2X7受体后对细胞生长的影响；进一步探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)对高表达P2X7受体的Caski细胞的生长影响。 方法：(1)应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)、免疫组化技术检测宫颈癌上P2X7受体的表达。(2)将质粒pcDNA6/V5-His-P2X7转染至Caski细胞,用RT-PCR、Western blotting、细胞免疫荧光等方法检测P2X7受体在真核细胞内的表达及定位,为检测高表达P2X7受体对细胞生长的影响用MTT法检测细胞增殖。(3)进一步检测P2X7受体的天然配体ATP处理后对高表达细胞生长的影响,用MTT检测细胞生存率,荧光染色法检测线粒体膜电位的变化,FCM检测细胞凋亡率以及Western blotting分析凋亡相关蛋白的变化。 结果：(1) RT-PCR、FCM、免疫组化结果表明在宫颈癌Caski细胞上P2X7受体的表达减少。(2)稳定细胞株的建立：通过抗性筛选获得稳定表达P2X7的Caski细胞株(Caski/P2X7)和阴性对照细胞株(Caski/3.1)。RT-PCR结果显示转染质粒pcDNA6/V5-His-P2X7的Caski细胞出现约180bp条带,阴性对照细胞株(Caski/3.1)无条带出现;Western blotting检测转染质粒pcDNA6/V5-His-P2X7的Caski细胞出现约75KDa的目的条带;荧光显微镜下观察结果显示在Caski细胞膜上有红色荧光,表明有P2X7的蛋白表达,而阴性对照细胞未见荧光。MTT分析高表达P2X7受体后可抑制Caski细胞增殖。(3)用ATP处理Caski/P2X7和Caski/3.1细胞后,与对照细胞Caski/3.1比较,ATP处理后抑制Caski/P2X7细胞增殖较明显(*,p<0.05);随着ATP浓度的增加FCM结果显示Caski/P2X7细胞凋亡率逐渐增加及线粒体膜电位逐渐降低;Western blotting检测结果显示Caski/P2X7细胞胞质细胞色素C的含量增多另外抗凋亡蛋白Bcl2减少促凋亡蛋白Bax增加。 结论：成功获得稳定高表达P2X7受体的宫颈癌Caski细胞株，并且用ATP作用细胞后可抑制细胞增殖，并诱导细胞凋亡，本研究结果提示P2X7可作为肿瘤治疗和预防的潜在靶点。