柿叶化学成分及生物活性的研究

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柿叶为柿科(Ebenaceae)柿属(Diospyros L.)植物柿(Diospyros kaki L. f.)的新鲜或干燥叶。用于止血、降压、治疗冠心病、心绞痛及胃溃疡出血、肺结核出血、功能性子宫出血等内脏出血病症。其化学成分较复杂,主要含有黄酮、三萜、酚类等化合物。 本文利用液-液萃取法、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相高效液相色谱、制备薄层色谱等手段,从柿叶中分离得到43个化合物,通过理化性质和波谱方法鉴定了34个化合物,分别为:4,6-Dihydroxy-2-O-β-O-glucopyranosyl-1,1’-diphenyl-one(1),4’,5-Dimethoxy-3-O-β-D-glucopyranosyl-4-hydroxy-biphenyl(2),4,4’-二羟基古柯间二酸(4,4’-Dihydroxy-α-truxillic acid)(3),菖蒲生物碱丙(Tatarine C)(4),Linarionoside A(5),Linarionoside B (6),Annulatin (7),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Isorhamnetin-3-O-β-D-glucopyranoside)(8),山萘酚-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(Kampferol-3-O-β-D-galactopyranoside,Trifolin)(9),山萘酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Kampferol-3-O-β-D-glucopyranoside,Astragalin)(10),山萘酚(Kampferol)(11),槲皮素-3-O-β-D-吡哺半乳糖苷(Quercetin-3-O-β-D-galacto-pyranoside,Hyperin)(12),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside,Isoquercetrin)(13),芦丁(Rutin)(14),槲皮素(Quercetin)(15),牡荆素(Vitexn)(16),2″-O-鼠李糖牡荆素(2″-O-Rhamnosylvitexin)(17),α-香树脂醇(α-Amyrin)(18),β-香树脂醇(β-Amyrin)(19),羽扇豆醇(Lupeol)(20),乌苏醇(Uvaol)(21),齐墩果酸(Oleanolic acid)(22),乌苏酸(Ursolic acid)(23),白桦酸(Betulinic acid)(24),19α-羟基乌苏酸(Pomolic acid)(25),19α,24-二羟基乌苏酸(19α,24-Dihydroxy ursolic acid) (26),Barbinervic acid (27),野蔷薇苷(Rosamutin) (28),胡萝卜苷(Daucosterol)(29),β-谷甾醇(β-Sitosterol)(30),原儿茶酸(3,4’-Dilhydroxy benzoic acid)(31),苯甲酸(Benzoic acid)(32),对羟基苯甲酸(p-Hydroxy benzoic acid)(33),丁二酸(Succinic acid)(34),其中化合物1和2为未见报道的新化合物,分别命名为柿叶酮(KakispyronC)(1)和柿叶酚(Xakispyxol)(2),化合物3,4,5,6,7,8,16,17,26,27,28为首次由柿属植物中分离得到的已知成分,化合物3,沈阳苗料大学协创七学位今仑j忆摘县4,5,6,7,8,16,17,18,19,20,25,26,27,28为首次由柿叶中分离得到的已知化合物。 本文综述了柿属植物化学成分及药理活性的研究进展,系统地总结了利用紫外、核磁共振、质谱、圆二色光谱及化学方法对黄酮碳昔类化合物进行结构解析的方法,总结了人中性粒细胞NADPH氧化酶的组成、激活过程以及自由基与疾病的关系。 在生物活性方面,本文对由柿叶中分离得到的5个三菇类化合物(18,21,23,25,26)和5个黄酮类化合物(8,9,10,12,14)进行了与抗炎和抗氧化作用相关的生物活性的研究,并初步探讨了它们的构效关系。实验发现,5个三菇类化合物和5个黄酮类化合物均对加LP诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示浓度依赖性抑制作用,其中化合物25的作用最强。化合物8、9、12、14、23、25、26对PMA诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示浓度依赖性抑制作用,其中化合物25的作用最强。而10、18、21则不显示抑制作用。化合物9、10、12、14对AA诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示浓度依赖性抑制作用,而8、18、21、23、25、26在低浓度时对AA诱导的人中性粒细胞自由基的产生显示轻微的促进作用,在高浓度时则显示抑制作用。 实验发现化合物8、9、14、23、25、26能够抑制舰LP诱导的中性粒细胞45kDa蛋白质酪氨酸残基的磷酸化,进一步阐明了它们抑制自由基产生的机理。 测试了5个黄酮类化合物的溶血作用,发现在明显高于显示抑制活性的浓度下也不发生溶血作用。
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