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背景:
舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)是头颈部最常见的恶性肿瘤,区域淋巴结转移率较高,具有很高的发病率和死亡率,以新辅助化疗作为治疗舌鳞癌的重要手段之一,对于控制肿瘤大小及保存口腔功能起着重要作用,在舌鳞癌的新辅助化疗方案中,以顺铂加5-氟尿嘧啶的PF方案为标准化疗方案。尽管PF新辅助化疗能够减少舌鳞癌患者的远处转移,但其五年生存率仍未有显著提高。近年来,中草药做为放化疗的辅助用药越来越得到学者的青睐,白花丹素(PB)是从白花丹植物根茎中分离的一种醌类成分,具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等多种生物活性。但白花丹素能否增强舌鳞癌对术前PF化疗的敏感性及其相关机制尚不清楚。
目的:
研究白花丹素联合术前PF方案对舌鳞状细胞癌(TSCC)的抗癌作用及其作用机制。
方法:
体外培养人舌鳞癌Cal27和舌鳞癌耐顺铂Cal27/CDDP细胞,采用CCK-8实验检测白花丹素、5-氟尿嘧啶及顺铂单独用药24h的半数抑制浓度(IC50)。通过CCK-8、Edu、克隆形成实验检测药物对细胞增殖能力的影响,并根据Chou-Talalay方程计算药物联合指数(Combination Index,CI)明确药物联合的相互作用。流式细胞术检测药物处理后细胞周期及凋亡的改变。透射电镜观察药物处理后细胞的自噬情况。Westernblot检测药物处理后细胞内凋亡、自噬及信号通路相关蛋白的表达。最后采用裸鼠移植瘤体内实验进行验证。
结果:
1.与PF组相比,PF联合PB作用组对Cal27、Cal27/CDDP细胞的增殖抑制作用更显著。2.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞周期阻滞于S期比例明显增加。3.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞凋亡比例和自噬水平显著增加。4.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞中PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6表达水平降低。5与PF组相比,联合用药组的裸鼠移植瘤体积更小、重量更轻、生长速度更缓慢、Ki67的表达水平更低。
结论:
白花丹素可通过调控PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路抑制舌鳞癌细胞增殖、诱导细胞周期S期阻滞、凋亡和自噬以提高舌鳞状细胞癌对PF化疗敏感性。
舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)是头颈部最常见的恶性肿瘤,区域淋巴结转移率较高,具有很高的发病率和死亡率,以新辅助化疗作为治疗舌鳞癌的重要手段之一,对于控制肿瘤大小及保存口腔功能起着重要作用,在舌鳞癌的新辅助化疗方案中,以顺铂加5-氟尿嘧啶的PF方案为标准化疗方案。尽管PF新辅助化疗能够减少舌鳞癌患者的远处转移,但其五年生存率仍未有显著提高。近年来,中草药做为放化疗的辅助用药越来越得到学者的青睐,白花丹素(PB)是从白花丹植物根茎中分离的一种醌类成分,具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等多种生物活性。但白花丹素能否增强舌鳞癌对术前PF化疗的敏感性及其相关机制尚不清楚。
目的:
研究白花丹素联合术前PF方案对舌鳞状细胞癌(TSCC)的抗癌作用及其作用机制。
方法:
体外培养人舌鳞癌Cal27和舌鳞癌耐顺铂Cal27/CDDP细胞,采用CCK-8实验检测白花丹素、5-氟尿嘧啶及顺铂单独用药24h的半数抑制浓度(IC50)。通过CCK-8、Edu、克隆形成实验检测药物对细胞增殖能力的影响,并根据Chou-Talalay方程计算药物联合指数(Combination Index,CI)明确药物联合的相互作用。流式细胞术检测药物处理后细胞周期及凋亡的改变。透射电镜观察药物处理后细胞的自噬情况。Westernblot检测药物处理后细胞内凋亡、自噬及信号通路相关蛋白的表达。最后采用裸鼠移植瘤体内实验进行验证。
结果:
1.与PF组相比,PF联合PB作用组对Cal27、Cal27/CDDP细胞的增殖抑制作用更显著。2.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞周期阻滞于S期比例明显增加。3.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞凋亡比例和自噬水平显著增加。4.与PF组相比,联合作用组的Cal27、Cal27/CDDP细胞中PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6表达水平降低。5与PF组相比,联合用药组的裸鼠移植瘤体积更小、重量更轻、生长速度更缓慢、Ki67的表达水平更低。
结论:
白花丹素可通过调控PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路抑制舌鳞癌细胞增殖、诱导细胞周期S期阻滞、凋亡和自噬以提高舌鳞状细胞癌对PF化疗敏感性。