[目的]：建立并鉴定两种不同来源树突状细胞(DC)培养体系，在体外诱导正常人外周血单个核细胞(PBMC)和脐血干细胞生成成熟DC，探讨细胞因子对DC的影响及DC在肿瘤免疫中的作用。[方法]：应用GM-CSF、IL-4和TNF-α的因子组合诱导激活PBMC来源的DC。脐血CD34+来源的DC以两步法，即0天开始使用GM-CSF、TNF-α、SCF、TPO、FL，8-14天用GM-CSF、TNF-α和IL-4诱导生成。并分别在形态(光学显微镜+电镜)、表面标记(流式细胞术)和功能(同种混合淋巴细胞反应)上加以鉴定。比较TNF-α、IL-1β、IFN-γ,、CD3mAb对于DC的体外促成熟效果。比较两类DC负载肿瘤抗原后激活细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀瘤效果。使用酶联免疫(ELISA)方法检测肝癌细胞上清液中与免疫抑制有关的因子及其对DC的影响。[结果]：在合适的细胞因子组合下，两种方法都能得到成熟的DC。其中PBMC在体外培养7天，获得的DC表达CD1a 47.6％、CD14 5.2％、CD80 8.87％、CD83 25.9％、CD86 59.5、HIA-DR 97.3％。脐血CD34+培养14天，获得DC表达CD34 2.6％、CD1a 31.3％、CD14 16.0％、CD80 13.9％、CD83 14.6％、CD86 18.1％、HLA-DR 71.5％。具备典型的DC形态并在体外有效刺激同种淋巴细胞增殖，效靶比为1：20时，刺激指数分别为16.28和13.9。TNF-α、IL-1β和IFN-γ对于DC的促成熟有类似的作用，都能促进DC高表达共刺激分子。同时两种来源的DC在负载了肿瘤抗原后对于CTL肿瘤杀伤有明显的增效作用，在效靶比为40：1时，杀瘤率为88.4％和87.7％。肝癌细胞也可以通过产生较高水平的 VEGF和 IL－10影响 DC的成熟。I结论1：外周血和脐血来源的DC功能类似，各有其特点，两种来源的DC都可以在肿瘤免疫中发挥强大作用。