绞股蓝皂苷的提取、分离纯化及抗氧化作用的研究

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绞股蓝的主要有效成分为绞股蓝皂苷,具有与人参皂苷相同的四环三萜达玛烷型的结构,因其有多种特殊的药理作用,在保健食品和新型药品研发上都有巨大的应用前景,是一种新的药食两用植物资源。本论文以福建南靖所产的绞股蓝为原料,对绞股蓝皂苷的提取、分离纯化工艺及抗氧化作用进行研究,得到以下结果:(1)在以水为提取剂的基础上,分别采用常规水浴法、单一酶法、单一超声波法、超声波协同酶法等试验方案提取绞股蓝皂苷。结果表明,超声波和纤维素酶对总皂苷的提取都有明显的促进作用,而采用超声波协同酶法促进效果更为明显。以料液比1:25,酶用量0.6%(m/m),溶液pH5.0,50℃酶解140min,灭酶15min后,再用超声波(190W,处理3s,间歇3s)于冰水混合物中处理20min为最佳的工艺条件,绞股蓝总皂苷的提取率达到7.494%。(2)研究了有机溶剂提取法提取绞股蓝皂苷的工艺条件,确定了以75%乙醇为提取剂,料液比为1:25,反应温度为80℃,反应时间120min为最佳工艺条件,在此条件下的绞股蓝总皂苷提取率为9.436%。(3)通过D101大孔吸附树脂初次纯化绞股蓝皂苷生药,结果表明:以30%乙醇洗脱的绞股蓝总皂苷(总皂苷A)纯度为29.70%,主要皂苷成分为人参皂苷Re,再经硅胶柱层析后得到总皂苷A’,总纯度得到显著提高,达到67.84%;以50%乙醇洗脱所得的绞股蓝总皂苷(总皂苷B)纯度为90.96%,其皂苷的主要组分为人参皂苷Rb1和Rb3,经硅胶柱层析后,纯度未见提高。(4)通过DPPH自由基法、硫酸亚铁-水杨酸-双氧水法、抑制脂质过氧化实验及还原力的测定,以抗坏血酸和绞股蓝生药为对照,考察了总皂苷A、A’、B的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、脂质过氧化抑制率及还原力。研究发现,自由基清除率及还原力大小从整体上排序均为:总皂苷A>总皂苷A’>总皂苷B。
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