论文部分内容阅读
鸡胚蛋是经过特殊孵化工艺使得其中的胚胎生长发育到一定阶段,具有生命力的受精鸡蛋。鸡胚蛋味道鲜美、营养丰富,在我国及东南亚民间常作为健脾胃、强身健体的药膳餐补食品。已有研究证实鸡胚蛋匀浆物对正常小鼠有免疫调节作用,本文旨在以水和石油醚为提取介质,通过研究鸡胚蛋被免疫低下小鼠摄入后其提取物于体内外的免疫调节作用,以探索免疫力低下机体摄入鸡胚蛋后的免疫效果。本论文以12日胚龄鸡胚蛋为原料,采用环磷酰胺对小鼠建立免疫力低下动物模型。先以免疫细胞增殖率为指标选择了水和石油醚为最佳提取溶剂,之后经动物实验综合考察了二种提取物对模型小鼠的免疫调节效果,再以体外细胞实验对提取物作用于免疫细胞和免疫分子的效果和剂量进行研究。体内外试验项目的选择主要依据我国卫生部颁发的《保健食品功能学评价程序和检验方法》。首先进行了提取溶剂的筛选。鸡胚蛋经体外模拟消化后,按极性大小选择水、75乙醇、乙酸乙酯和石油醚为提取溶剂,以体外脾淋巴细胞增殖实验和巨噬细胞增殖实验为指标,确定了水和石油醚为提取溶剂得到的粗提物的免疫活性最高。选择水和石油醚为提取溶剂,得到鸡胚水溶物和鸡胚脂溶物,以腹腔灌胃的方式给予免疫低下小鼠鸡胚提取物,并以鸡胚蛋粉为对照进行体内动物实验。经四周灌胃实验后,发现鸡胚蛋粉、鸡胚水溶物和脂溶物均可显著地增加模型小鼠的体重、提高脾脏指数以及血清白细胞介素-2含量、增强细胞免疫以及体液免疫反应,三者的免疫调节效力大小为鸡胚脂溶物>鸡胚水溶物>鸡胚蛋粉。鸡胚蛋经体外模拟消化后,以水和石油醚为提取溶剂,对水溶物和脂溶物作用于免疫低下小鼠的免疫细胞和免疫分子的效果以体外细胞实验进行了研究,并对量效关系进行了探索。实验结果显示:鸡胚蛋经消化后其脂溶部分可显著地促进脾淋巴细胞增殖并分泌白细胞介素-2,而水溶部分则对巨噬细胞的吞噬能力、释放NO能力以及NK细胞肿瘤杀伤活性显示出更强的刺激作用;二者在10-500μg/mL浓度范围内对各免疫指标(水溶物对脾淋巴细胞分泌IL-2除外)均呈现出良好的量效正相关(R2>0.86),高浓度的提取物可使受损的模型小鼠免疫功能恢复到正常小鼠水平(NK细胞活性实验除外)。综上,体内外实验的结果表明鸡胚蛋能正向调节免疫低下小鼠的免疫功能:在免疫低下小鼠摄入鸡胚蛋后,脂溶部分主要作用于脾脏淋巴细胞参与特异性免疫反应,水溶部分作用于巨噬细胞和NK细胞参与非特异性免疫反应,并刺激其产生特性的免疫分子,这种调节作用随着剂量的增大而加强;同时,体内外实验均显示鸡胚蛋对胸腺不具显著的刺激作用。