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种植义齿要在口腔环境中获得长期的稳定,不仅需要稳固的种植体-骨结合,种植体-牙龈上皮结合界面作为生物屏障在抵御病原体入侵中也极为重要。与天然牙-结合上皮界面相似,种植体周围上皮主要依靠内基板和半桥粒附着在种植体表面。然而,种植体与牙龈的结合较为薄弱,上皮的附着仅局限在根方1/3。内基板中的重要组份为laminin 332,其中的α3链在细胞行为的调控以及半桥粒的形成中起重要作用。本研究通过在种植体表面构建载LAMA3基因的生物涂层,利用体内、体外实验进行生物学评价,并探讨该涂层在种植体周围上皮附着形成中的作用及机制。本研究中首先利用层层自组装技术在纯钛表面制备由壳聚糖(CS)、透明质酸(HA)和IV型胶原(COL)组装的生物涂层,通过扫描电镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)、X射线光电子能谱(XPS)和接触角测试仪对不同组装层数以及交联前后的涂层进行检测,并评估各组样品对上皮细胞活性的影响。综合表面形貌以及XPS的检测结果,表明CS/(HA/COL)n多层膜组装至5层时经化学交联后的涂层较为稳定,因此选取5层作为后续研究中的组装层数。细胞活性检测结果也表明CS/(HA/COL)n涂层在化学交联前后都具有良好的细胞相容性。在构建完成CS/(HA/COL)5涂层的基础上,将抗腺病毒抗体偶联至涂层表面,利用抗原-抗体的特异性结合将载LAMA3重组腺病毒固定在CS/(HA/COL)5涂层上,从而实现纯钛表面LAMA3基因原位转染体系的构建。通过条件优化,偶联抗体的最佳浓度为30μg/孔,每个样品腺病毒使用量为1×108PFU。然后利用人永生化表皮细胞HaCaT对纯钛表面载LAMA3基因涂层进行细胞学评价。结果表明该涂层有利于上皮细胞的早期粘附和伸展,能有效提高lamininα3的表达,并能诱导结合界面成熟半桥粒结构的形成。最后通过体内实验,利用免疫组织形态学、透射电镜观察和辣根过氧化物酶(HRP)浸润性检测等研究纯钛表面载LAMA3涂层在种植体-牙龈生物学封闭形成中的作用。结果表明该涂层在创伤早期可以有效提高种植体周围上皮laminin a3的表达,加快种植体周围上皮的形成,促进种植体-牙龈结合界面半桥粒的整合,相比于光滑表面种植体组可以明显减少HRP在种植体周围牙龈组织中的浸润。本研究在纯钛表面构建载LAMA3基因的生物涂层,能有效实现种植体表面原位基因转染,提高上皮细胞中laminin a3链的表达。体内、外的研究均表明该涂层有利于上皮细胞的早期粘附和伸展,促进结合界面上半桥粒结构的形成,并有效改善种植体-牙龈上皮的生物学封闭。本文为促进种植体周围上皮附着形成和改善种植体-牙龈生物学封闭的研究提供了新的思路以及实验依据。