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育雏期是蛋鸡肠道发育和微生物定植的关键时期。家禽生产中常出现因肠道发育问题引发雏鸡腹泻和营养吸收不良,对后期生长和生产造成不可逆损伤。此外,肠道中定植着种类多样、数量众多的微生物,对雏鸡早期肠道发育十分重要。该文通过联合应用微生物16S rRNA高通量测序和代谢组技术,研究了胚蛋给养L-精氨酸（L-Arg）对蛋鸡胚胎期和出壳早期肠道发育与微生物区系的影响,探讨了早期微生物定植在肠道发育中的作用,为超早期营养调控家禽的肠道发育提供了新的思路。试验一、胚蛋给养L-精氨酸对蛋雏鸡肠道早期发育的影响。试验处理包括未注射对照组、注射生理盐水对照组和每枚种蛋注射2、6和10 mg L-Arg组。结果表明,胚蛋给养L-Arg对蛋雏鸡孵化率和1-14日龄生长性能无显著影响（P>0.05）,但提高了21日龄和42日龄体重（P<0.05）。3日龄雏鸡的十二指肠指数和14、42日龄雏鸡的空肠指数随L-Arg给养剂量呈线性和二次增加（P<0.05）。与对照组相比,胚蛋给养10 mg/枚L-Arg降低3日龄雏鸡十二指肠隐窝深度,提高空肠绒毛高度/隐窝深度（P<0.05）;并提高14日龄雏鸡十二指肠绒毛高度、空肠绒毛高度/隐窝深度以及空肠上皮细胞增殖指数（P<0.05）。但42日龄雏鸡的各肠段形态结构未发现显著差异（P>0.05）。此外,胚蛋给养L-Arg降低3日龄和14日龄蛋雏鸡血清甘油三酯含量（P<0.05）,增加血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量（P<0.05）;与对照组相比,L-Arg组14日龄蛋雏鸡的血清高密度脂蛋白胆固醇和葡萄糖含量显著升高（P<0.05）。本试验表明,胚蛋给养L-Arg可加快蛋雏鸡肠道早期发育,改善肠道绒毛结构,促进蛋雏鸡生长;以0-21日龄蛋雏鸡料重比为判据,确定适宜的注射剂量为7 mg L-Arg/枚。试验二、胚蛋给养L-精氨酸对蛋雏鸡肠道微生物区系和机体代谢的影响。试验设计同试验一。结果表明,与对照组相比,胚蛋给养6 mg/枚和10 mg/枚L-Arg显著增加3日龄雏鸡盲肠微生物α多样性（P<0.05）。主坐标分析（PCoA）分析表明,3日龄各组雏鸡肠道微生物差异较大,随着日龄的增大,组间差异逐渐缩小。与对照组相比,L-Arg给养组雏鸡肠道发育加快,盲肠Firmicutes相对丰度升高,Proteobacteria相对丰度降低。并且Lactobacillus、norankfRuminococcaceae和ClostridialesvadinBB60group在肠道发育加快的雏鸡中定植时间早于对照组。Spearman相关分析结果显示,与肠道形态结构发育显著正相关的菌属大多为产短链脂肪酸的微生物,而一些潜在致病菌与肠道形态结构呈显著负相关（P<0.05）。代谢组学分析进一步表明,L-Arg给养组雏鸡在半乳糖代谢、初级胆汁酸代谢和脂质代谢上与对照组存在显著差异（P<0.05）。本试验提示,胚蛋给养L-Arg可加速蛋雏鸡早期盲肠微生物区系的演替和益生菌定植,并改变机体的半乳糖、初级胆汁酸和脂质代谢,促使更多能量和营养素用于雏鸡肠道的早期快速发育。试验三、胚蛋给养L-精氨酸对胚胎期肠道发育和微生物区系的影响。采用双因素（种蛋类型:SPF种蛋,普通种蛋;胚蛋给养:不注射,注射L-Arg）试验设计。每种种蛋设有不注射（对照）和注射L-Arg处理,共分为4组,孵化第17.5天进行胚蛋羊膜腔注射。结果表明,普通种蛋组微生物DNA拷贝数显著高于SPF种蛋中微生物DNA拷贝数（P<0.05）。17胚龄时（注射前）,SPF组与普通种蛋组的胚胎重、绝对体质量、卵黄囊指数和肠道指数均无显著差异（P>0.05）;19和21胚龄时（注射后）,与不注射组相比,胚蛋给养L-Arg增加了SPF种蛋和普通种蛋胚胎肠道指数、绒毛高度和绒毛宽度（P<0.05）。但未发现SPF种蛋和普通种蛋的肠道指数和肠道形态方面有显著差异（P>0.05）。此外,与普通种蛋不注射组相比,胚蛋给养L-Arg显著提高了SPF和普通种蛋空肠mTOR和4E-BP1基因mRNA相对表达量（P<0.05）。鸡胚肠道微生物组成分析表明,与普通种蛋不注射组相比,胚蛋给养L-Arg显著增加21胚龄SPF和普通种蛋胚胎肠道微生物α多样性（P<0.05）,但对19胚龄各组肠道微生物α多样性无显著性影响（P>0.05）。PCoA分析表明,19胚龄各组微生物组成无显著差异,但21胚龄SPF和普通种蛋注射组微生物组成比较相似,且与普通种蛋不注射组有明显差异。SPF和普通种蛋注射组肠道中Firmicutes相对丰度显著高于普通种蛋不注射组（P<0.05）,且肠道中Proteobacteria和Acidobacteria相对丰度有下降趋势（P<0.10）。在属水平,SPF和普通种蛋注射组肠道中Blautia、Bifidobacterium、Streptococcus、Agathobacter、Ruminococcus1、Chryseobacterium和Holdemanella相对丰度显著增加（P<0.05）。微生物功能预测结果显示,SPF和普通种蛋注射组2个碳水化合物代谢通路（淀粉与蔗糖代谢、果糖和甘露糖代谢）,3个脂质代谢通路（初级胆汁酸合成、次级胆汁酸合成和类固醇合成）,1个氨基酸代谢通路（氰基氨基酸代谢）、1个消化系统通路（碳水化合物消化与吸收）和在环境信息处理中的1个膜转运通路（磷酸转移酶系统）在SPF和普通种蛋注射组中显著富集（P<0.05）。此外,胚蛋给养L-Arg显著增加SPF和普通种蛋注射组微生物代谢产物中甲酸和丁酸含量（P<0.05）。本试验表明,胚蛋给养L-Arg可促进鸡胚肠道发育和微生物区系的演替,并增加菌群代谢产物SCFAs的含量,为肠道发育提供更多能量。此外,种蛋携菌量并不会影响LArg给养对鸡胚肠道发育和微生物区系成熟的促进作用。综上,胚蛋给养L-Arg可促进蛋鸡胚胎期和出壳早期肠道发育,促进蛋雏鸡生长。同时,加速早期肠道微生物区系的演替及有益菌的定植,增加短链脂肪酸含量,并通过调节机体碳水化合物、脂质、胆汁酸和膜转运的代谢,为肠道发育提供更多能量。