论文部分内容阅读
研究目的:本实验选取的实验对象为6-羟基多巴胺氢溴酸盐(6-OHDA)帕金森大鼠,运用规律有氧运动的干预办法,探讨规律有氧运动对6-OHDA诱发的帕金森大鼠纹状体突触可塑性相关蛋白突触素(SYN)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)、钙调蛋白激酶(CaMK)信号通路的影响,探索规律有氧运动对帕金森(PD)的神经保护作用,为临床上治疗PD提供实验理论依据。研究方法:选择48只3月龄的SPF级健康雄性SD大鼠,随机分为4组,分别为安静生理盐水组(SED)和运动生理盐水组(EX);安静PD组(SED-PD)和运动PD组(EX-PD),先进行3天适应训练(速度为10m/min,第一天10min,第二天20min,第三天25min,坡度均为0°)。休息一天后,按运动方案进行8周运动。运动干预后,集体进行造模。造模完成后所有大鼠恢复3-4天,运动组接受2周的恢复训练。每周训练五次,周三、周日休息。建模结束后第7天和第14天进行行为学检测,最后一次行为学检测24h后取四组大鼠的纹状体检测。HE染色观察脑纹状体形态结构变化、免疫组织化学检测纹状体α-突触核蛋白(α-synuclein)、酪氨酸氢化酶(TH)、SYN、P SD-95、CaMKⅡα、亚谷氨酸受体(AMPAR)蛋白的表达,RT-qPCR检测纹状体SYN、PSD-95、CaMKⅡα、AMPAR mRNA的表达。研究结果:(1)神经行为学旋转实验结果:PD的疾病发生率分别为SED-PD组77.78%,EX-PD组71.43%。(2)HE染色:实验组大鼠6-OHDA注射位点均位于损伤侧,其SED、EX组大鼠纹状体可以清楚的看到致密带,神经元细胞数目多,形状完好、排列井然有序。SED-PD、EX-PD组纹状体难以分辨出致密带,神经损伤明显,神经元和神经纤维变性、坏死、缺失,正常的神经元结构很少。(3)IHC结果显示:与相对应的静息各组大鼠相比,运动组大鼠纹状体TH蛋白表达明显增加呈上调趋势,SYN、PSD-95、CaMKⅡα、AMPAR蛋白表达明显增加,呈上升趋势,EX组和EX-PD组α-synuclein蛋白表达明显减少,呈下降趋势。(4)RT-qPCR结果显示:运动促进大鼠纹状体SYN、PSD-95、CaMKⅡα、AMPAR mRNA表达水平增加;与SED组相比,SED-PD组大鼠纹状体SYN、PSD-95、CaMKⅡα、AMPAR mRNA的表达量显著下降(P<0.01);与EX组相比,EX-PD组大鼠纹状体SYN、CaM KⅡα、AMPAR mRNA的表达量显著下降(P<0.01),PSD-95mRNA表达量显著下降(P<0.05);与SED-PD组相比,EX-PD组大鼠纹状体SYN、PSD-95、CaMKⅡα、AMPAR mRNA的表达量显著增加(P<0.05);与SED组相比,EX组大鼠纹状体SYN mRNA的表达量显著增加(P<0.01),PSD-95、CaMKⅡαmRNA的表达量稍有增加(P>0.05),AMPA R mRNA的表达量显著增加(P<0.05)。研究结论:规律有氧运动干预降低了PD疾病发生率,一定程度上有效缓解6-OHDA毒性作用,预防并降低了大鼠的行为学功能障碍,增加了相关蛋白SYN、PSD-95的表达,并调控CaMKⅡα/AMPA R信号通路,改善突触形态和功能的可塑性,并降低脑纹状体α-synu clein的表达,发挥规律有氧运动对PD大鼠脑纹状体的神经保护作用。