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细胞自噬(Autophagy)是真核生物用于清除胞内聚集物、损伤细胞器而维持其稳态平衡的一种溶酶体降解途径。细胞自噬不仅在细胞生长发育、成熟分化等过程中起着重要作用，且与多种疾病发生、病毒感染与免疫等密切相关。乙肝病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引起的乙型肝炎严重影响着我国人口健康。HBV属嗜肝DNA病毒科，其为一种囊膜病毒，病毒基因组DNA呈部分双链。HBV出芽释放时要经过内质网-高尔基体中间体，然后成熟的病毒粒子再通过双层膜结构的包裹到达细胞表面，释放到胞外。
本文首先研究了细胞自噬对乙肝病毒释放的影响，利用HBV表达质粒瞬时或稳定转染不同的肝癌细胞，通过透射电镜和共聚焦荧光显微镜观察了HBV感染的细胞引起的自噬，检测了HBV表面蛋白HBs和细胞自噬标志蛋白LC3在细胞中的共定位情况；药物及siRNA处理使自噬体双层膜减少时，胞外病毒蛋白HBs和HBV DNA显著减少，而药物及siRNA处理使自噬体双层膜增加时，胞外病毒蛋白HBs和HBV DNA显著增加；检测HBV感染的细胞抑制自噬体与溶酶体融合。这一结果表明细胞自噬形成的双层膜有利于HBV的释放，这为进一步阐明HBV的释放机理以及对HBV的预防和治疗提供了新思路。天然免疫(innate immunity)是宿主抵抗病原微生物感染的第一道防线。细胞通过其表面或胞质中的模式识别受体(pattern recognition receptor，PRR)来识别入侵的病原微生物，从而触发天然免疫消灭或降低病原微生物的入侵。干扰素具有抗病毒及免疫调节的双重作用，是CHB的首选药物之一。为了研究细胞自噬对乙肝病毒感染的I型干扰素的影响，通过敲降HBV感染的肝癌细胞中自噬关键因子Beclinl和Atg7，转染自噬标志融合蛋白GFP-LC3质粒，检测自噬小体形成，Real-Time PCR检测干扰素表达及对细胞凋亡的检测。结果表明干扰Beclinl和Atg7均可抑制细胞自噬发生，抑制细胞自噬可降低HBV感染细胞系IFNβ和IFI27 mRNA的表达。这在一定程度上意味着HBV诱导的自噬具有增强感染细胞天然免疫反应的作用。通过本研究为进一步阐明提高HBV感染细胞的天然免疫，打破免疫耐受提供了新的思路。