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目的： 探讨大肠埃希菌(Escherichia coli，E.coli)在不同渗透压、渗透压突然改变的培养基中的生长情况，培养基渗透压突然改变后对其水-甘油通道蛋白(glycerol protein ficilitator，GlpF)表达的影响，以了解大肠埃希菌GlpF的生理功能。 方法： 1.配制不同渗透压的液体培养基：配制等渗透压液体培养基、渗透压为1/4 IM、1/2 IM、2IM、4IM、8IM的液体培养基。 2.观察大肠埃希菌在不同渗透压培养基中的生长情况：将大肠埃希菌接种于等渗透压的液体培养基培养18小时后，分别转入渗透压为1/4IM、1/2 IM、1IM、2IM、4IM、8IM的液体培养基中，置37℃培养，分别在2h、4h、8h、12h、18h、24h、30h、36h、48h和72h时间点取培养液，OD600nm检测其细菌量，分析生长繁殖情况。 3.观察大肠埃希菌在培养基渗透压突然改变下的生长情况：将大肠埃希菌接种于等渗透压的液体培养基培养18小时后，将培养基渗透压突然改变为1/4IM、1/2 IM、2 IM、4 IM、8 IM，维持培养基的营养成分，置37℃培养，在培养的第30分钟、60分钟、120分钟时间点，OD600nm检测其细菌量，分析细菌生长繁殖情况。 4.RT-PCR分析大肠埃希菌GlpF的表达：对在1/2 IM、1IM、2IM液体培养基中生长的细菌，用RT-PCR方法扩增其GlpF mRNA片段，同时以培养液的渗透压未改变，培养基营养成分的浓度与实验管相同的培养基中生长的大肠埃希菌做为1/2 IM组的对照，分析细菌GlpF的表达，比较突然改变渗透压后对大肠埃希菌GlpF表达的影响。 结果： 1.大肠埃希菌在等渗培养基中的生长曲线符合正常细菌的生长曲线，在渗透压为1/2IM、2IM的培养基中的生长曲线也基本附合正常曲线，但各期的OD600nm值均略低于在等渗培养基中的值，而在1/4IM、4IM及8IM培养基中，其生长曲线已经与正常曲线不相吻合，且各期OD600nm值降低明显。 2.突然改变渗透压后，大肠埃希菌数量均有不同程度的减少。在1/2IM组、1/4IM组细菌的OD600nm值与其各自对照组相比，变化并不明显，但其细菌GlpF表达量明显降低。在高渗组，2IM组的OD600nm值与等渗组相比变化不大，而其GlpF表达量明显高于等渗组。 结论： 外环境的渗透压是影响细菌生长繁殖的一个重要因素，观察细菌在外环境渗透压改变后的生长繁殖情况及在分子水平研究其对抗这种变化的机制有重要意义。本实验得到的结论为： 1.在外环境渗透压在一定范围内变化时，细菌可以通过自身调节适应环境，细菌的生长繁殖不会发生明显改变。 2.在外环境渗透压变化相对较大时，细菌不能适应环境，细菌的生长繁殖速度明显降低。 3.在外环境渗透压突然改变的条件下，细菌可以通过调控GlpF的表达量来实现对细菌细胞内外水份的调节，以维持胞内环境稳定。 4.低渗透压抑制GlpF的表达，高渗透压则诱导GlpF的表达。