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目的:探究人骨形成蛋白9对膀胱癌细胞增殖和迁移作用的影响及作用机制。方法:采用生物信息学技术在膀胱癌相关数据库中查询BMP9在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异。使用RT-PCR和Western-blot法分别检测不同膀胱癌细胞中BMP9基因和蛋白表达水平,找出BMP9高水平和低水平表达的膀胱癌细胞各一株进行后续实验。将BMP9过表达腺病毒(AdBMP9)、BMP9干扰腺病毒(AdsiBMP9)分别感染BMP9低表达的膀胱癌细胞BIU-87细胞和BMP9高表达的膀胱癌T24细胞,构建高表达BMP9的膀胱癌细胞(BIU-87/AdBMP9)和低表达BMP9的膀胱癌细胞(T24/AdsiBMP9),利用RT-PCR及Western-blot技术验证细胞模型是否成功建立。利用MTT试验、集落形成试验和EDU增殖试验检测BMP9对膀胱癌细胞增殖的影响;利用划痕愈合试验和MTT迁移试验检测BMP9对膀胱癌细胞迁移的影响。利用RT-PCR检测BIU-87/AdBMP9细胞中与膀胱癌增殖迁移相关lncRNA的表达变化,选择表达增加最明显的lncRNA UCA1做下一步研究。构建UCA1的小分子干扰RNA片段,转染膀胱癌细胞构建BIU-87/AdBMP9+siUCA1模型。利用MTT试验、集落形成试验和EDU增殖试验检测BIU-87细胞的增殖情况;利用划痕愈合试验和Transwell迁移试验检测BIU-87细胞的迁移情况;利用Western-blot检测BIU-87/AdBMP9+siUCA1细胞中BMP9相关信号通路蛋白AKT及p-AKT、细胞增殖标志物PCNA和细胞迁移标志物MMP9的变化。在BIU-87/AdBMP9细胞中加入AKT抑制剂LY294002后,利用RT-PCR试验检测lncRNA UCA1的表达变化,验证AKT信号通路在BMP9-UCA1轴中的作用。采用动物模型在体内验证BMP9对膀胱癌细胞的作用。将BIU-87/AdBMP9和BIU/AdBMP9+siUCA1细胞分别接种至雄性裸鼠皮下,观察瘤体生长情况。20天后收集瘤体,做石蜡包埋并切片,对组织切片做HE染色和免疫组化染色,观察成瘤情况及p-AKT、MMP9及PCNA在瘤体中的表达情况。结果:膀胱癌T24细胞中BMP9的表达量高于BIU-87细胞;MTT试验、集落形成试验和EDU增殖试验结果表明,BMP9可以促进膀胱癌细胞的增殖能力;划痕愈合试验和Transwell迁移试验结果表明,BMP9可以促进膀胱癌细胞的迁移能力。机制研究结果表明:BMP9可以促进膀胱癌细胞中lncRNA UCA1的表达;MTT试验、集落形成试验和EDU增殖试验结果表明,干扰UCA1后BMP9对BIU-87细胞的增殖促进作用被降低;而划痕愈合试验和Transwell迁移实验结果表示干扰UCA1同样可以降低BMP9对膀胱癌细胞的迁移促进作用;Western-blot结果显示BIU-87/AdBMP9细胞的增殖标志物PCNA和迁移标志物MMP9明显上调,而干扰UCA1后,这种上调作用被明显降低。Western-blot结果同样显示BIU-87/AdBMP9细胞的AKT信号通路被激活,而使用AKT蛋白抑制剂LY294002处理BIU-87/AdBMP9细胞后,RT-PCR结果显示,BMP9对UCA1的促进作用被降低。体内实验结果表明:过表达BMP9后,膀胱癌BIU-87细胞的成瘤能力明显增强,瘤体生长速度明显上升,而干扰UCA1后,这种促进作用被明显降低;瘤体切片后HE染色结果表明,皮下注射的膀胱癌细胞成功成瘤;免疫组化试验结果表明,BMP9可以上调膀胱癌细胞中p-AKT、PCNA和MMP9的表达。结论:BMP9可以通过激活AKT信号通路,上调lncRNA UCA1的表达,从而促进膀胱癌细胞的增殖和迁移。