增生性玻璃体视网膜病变( Proliferative vitreoretinopathy,PVR)是指在孔源性视网膜脱离或视网膜复位手术后,以及眼外伤后,由于视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)、神经胶质细胞、成纤维细胞、巨噬细胞的迁移、增生、转分化和收缩,在视网膜前、后面及玻璃体内形成的可以收缩的细胞性膜,造成牵拉性视网膜脱离病变。大多数学者认为视网膜色素上皮细胞和神经胶质细胞的增殖和移行是PVR的发生的关键因素,目前越来越多的研究表明,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对诱发RPE的增殖、移行,并最终导致PVR起到了重要作用。本实验针对HGF基因,应用RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术,在HGF基因的mRNA序列上寻找三个干涉靶点,分别通过化学合成的siRNA和小发夹RNA质粒表达载体转染人视网膜色素上皮细胞及大鼠玻璃体腔,经逆转录PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白免疫印迹技术(Western-blot)等方法来检测其HGF干涉效果,筛选有效干涉靶位点,并进一步研究HGF与视网膜色素上皮细胞及PVR的关系。本研究的创新性包括:(1)成功筛选出HGF基因有效干涉靶点序列;(2)构建高效转录该靶序列的pGCU6/GFP/Neo-shRNA质粒载体;(3)利用pGCU6/GFP/Neo-shRNA抑制RPE细胞的增殖和迁移,为最终预防和治疗PVR奠定实验基础。