骨缺损是由于外伤、肿瘤、遗传等多种因素所致的一种常见疾病，目前治疗骨缺损的方法主要有自体骨移植、异体骨移植、组织工程技术、基因治疗法及生长因子辅助治疗等。由于各种方法存在不同程度的局限性，且学界对其治疗缺乏统一性，所以骨缺损已成为骨科治疗的难题之一。促红细胞生成素（EPO）作为一种临床中治疗贫血的药物，目前被发现具有抗凋亡、抗炎、组织保护等多种非造血功能。最新发现，EPO还能够促进骨折的愈合，但其具体的作用机制尚不明确。目前认为，EPO促进骨折愈合可能的机制有以下两个方面：第一，EPO可以作用于成骨及破骨细胞，从而直接的促进骨折的愈合；第二，EPO作为一种强大的抗炎、抗凋亡、组织保护因子，能够在骨折愈合的过程中减轻炎症反应，保护与骨形成、骨折愈合相关的细胞、组织，从而间接地加快了骨折愈合的过程。目的：通过EPO对成骨细胞、骨髓间充质干细胞作用的实验研究，探讨EPO对骨形成的作用及机制，并间接地证明EPO促进骨折愈合的机制，从而为骨损伤修复的治疗提供新的方法。方法：实验主要是研究EPO对于C3H10T1/2（鼠的间充质干细胞）细胞系及ROS（鼠的骨肉瘤细胞）细胞系的作用。实验共分为四组，分别为10T1/2组和ROS组（加入含10%FBS的DMEM培养基，100U/L青霉素，100U/L链霉素）及10T1/2组和ROS组（加入含10%FBS的DMEM培养基，50μmol/L维生素C，10mmol/L β-甘油磷酸，100U/L青霉素，100U/L链霉素）。每天更换培养基并在各组给予不同浓度的EPO（0.3,3,30,100,300U/L），分别在第2,4,8天进行形态学观察，碱性磷酸酶染色或Von-kossa染色。结果：成骨细胞的形态学观察：刚刚传代的ROS细胞，由于尚未贴壁生长，光镜下呈球形；于37℃细胞培养箱内培养一天后，观察细胞已经贴壁，形态呈梭型或三角形，并带有多个突起。培养两天后，细胞可铺满整个6孔培养板，呈半融合。给予EPO后第四天，细胞融合成片，互相重叠呈铺路石状，部分成骨细胞相互聚集，形成不透光的矿化结节。给予EPO后第八天，矿化结节数量增多，细胞层叠生长并出现生长抑制，部分细胞死亡。骨髓间充质干细胞的形态学观察：C3H10T1/2细胞刚刚传代后，在倒置显微镜下观察呈球形。于37℃细胞培养箱内培养一天后，细胞已经贴壁生长，呈圆形、梭型、多角形，排列稀疏。给予EPO后第三天，细胞排列呈旋涡状或束状，均匀的铺满孔板。给予EPO第四天，细胞排列紧密，部分细胞形态转为三角形，未见矿化结节。给予EPO后第八天，三角形细胞比例逐渐增多，仍无矿化结节，细胞出现生长抑制，部分细胞死亡。碱性磷酸酶染色：在给予EPO第二天后的碱性磷酸酶染色中，ROS组无论是在普通培养基还是在分化培养基中，不同浓度的EPO（0.3、3.0、30、300U/L）与对照组间均无显著差异，且ROS普通组与ROS分化组之间的亦无显著差异。C3H10T1/2组在两种培养基中，不同浓度的EPO（0.3、3.0、30、300U/L）与对照组间无显著差异，且C3H10T1/2普通组与C3H10T1/2分化组之间的亦无显著差异。Von-kossa矿化结节染色：在给予EPO后第四天、第八天，分别对ROS分化组、C3H10T1/2分化组2组细胞进行Von-kossa矿化结节染色。给药后第四天，ROS组与C3H10T1/2组均未见矿化结节着色。在给药后第八天，ROS组各孔中均出现矿化结节着色，且无显著差异。而C3H10T1/2组培养板的各孔中仍未见矿化结节着色。结论：EPO对成骨细胞及骨髓间充质干细胞的增殖、分化及成熟无明显促进作用。EPO促进骨折愈合的机制仍待进一步证明及研究。