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糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一种因体内胰岛素绝对或者相对不足引起的以糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱而导致多系统、多脏器损害的一种常见内分泌代谢疾病，逐渐成为21世纪威胁人类健康的第五大杀手。全世界有3.46亿人患有糖尿病，近30年来，我国糖尿病患病率显著增加。据WHO预测，至2015年，中国糖尿病患病率将达到10％，DM患者将超过1亿。2型糖尿病(type2 diabetesmellitus，T2D)是由于组织细胞的胰岛素抵抗或者是胰岛素分泌功能障碍造成的一类复杂性疾病，占糖尿病患者中的90％左右。2型糖尿病是遗传因素及环境因素共同作用引起的，其中遗传因素包括核基因遗传与线粒体基因遗传。线粒体基因突变引起的线粒体功能障碍是2型糖尿病的重要发病因素之一，然而目前关于线粒体基因突变的致病机制尚存在争议。 本论文针对一个汉族母系遗传性糖尿病家系17名对象进行研究。通过采集该家系糖尿病患者及相同线粒体基因组单体型正常人血液样品，经分离培养，建立患者及正常人淋巴细胞系。提取淋巴细胞基因组DNA，利用24对线粒体通用引物进行PCR扩增，通过基因组全序列分析发现了一个新的线粒体基因A14692G突变位点。通过设计新引物，引入MboⅠ酶切位点，酶切鉴定结果显示此突变位点普遍存在于该家系患者中且为同质性突变。ClustalⅩ软件对该位点进化保守性分析发现A14692G位点在灵长类物种中是高度保守的。SeahorseFX-96 oxygraph检测携线粒体基因tRNAGluA14692G突变位点对细胞氧气消耗速率(OCR)的影响，结果显示携线粒体tRNAGlu A14692G突变位点细胞基础氧耗速率、ATP产生相关氧耗速率、最大氧耗速率以及质子漏氧耗速率显著低于同一单体型对照组细胞;ROS产生水平的检测显示，携线粒体tRNAGlu A14692G突变细胞株在氧化应激条件下ROS的产生水平显著高于对照细胞株。利用ATP检测试剂盒检测携线粒体tRNAGlu A14692G突变细胞株ATP生成水平，发现携线粒体tRNAGlu A14692G突变细胞株ATP生成水平低于对照细胞株。通过northern blot技术对tRNAGlu水平进行检测发现，A14692G突变细胞的tRNAGlu水平显著低于对照细胞。随后，将利用western blot的方法对线粒体氧化磷酸化复合物蛋白水平进行进一步的研究。 综上所述，本论文成功鉴定了母系遗传2型糖尿病家系中的新突变——线粒体tRNAGluA14692G。通过对病人与常人淋巴细胞的线粒体功能及基因表达的研究，阐明了该突变位点的可能致病机制。不仅为2型糖尿病致病机制的研究提供了新的方向，还为2型糖尿病的分子诊断提供了新的理论依据，也为2型糖尿病的治疗提供了新的思路。