土壤淡色丝孢真菌稀有物种的挖掘及有生防潜力丝孢菌的筛选

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河南地处中纬度地带,是我国的中原地区,地势西高东低,地表形态复杂多样。土壤真菌的多样性是随着土壤类型和植被而变化的。土壤丝孢真菌种类多,分布广,是土壤真菌的一个重要组成部分。河南省是粮食大省,属于气候的中间过渡带,真菌物种资源丰富,真菌资源的研究和挖掘并不充分。为开发和保护我国真菌物种资源,挖掘新物种,进一步完善我国丝孢真菌数据,开发具有抗菌活性的土壤真菌,这对河南省土壤丝孢真菌的多样性研究具有重要的意义。(1)土壤丝孢真菌的收集情况本研究为了挖掘土壤淡色丝孢真菌稀有物种和筛选有抗菌活性的菌株,对河南省的81个县市,及山东、湖北、内蒙古、江苏、云南和安徽的部分地区进行土样采样,样品涉及的有农田土、湿地土、草地土、公园土、山谷土、森林土、果园土、盆景土等生态类型。共采集土样827份,收集菌株743株,分属于26个属,贝叶斯法和最大似然法构建系统发育树,通过多基因(ITS、LSU、rpb2、tef1-α、HIS3、cmdA、tub2)系统发育分析数据和形态学相结合鉴定了 35个已知种,15个新种,涉及的8个新纪录种分属于5个新记录属。(2)生防菌株的初步筛选我们根据已有的研究报道,对分离得到的淡色丝孢真菌进行生防活性的检测。本研究选取Myrothecium-like、Stachybotrys-like、Clonostachys和 这四个类群的菌株(共 66 株),采用特定培养基室内平板初筛、平板复筛和代谢液培养选出5株(HN17434、HN17556、HN17216、HN17506、HN17479)对小麦根腐病原菌麦根腐蠕孢菌具有抑菌效果的土壤生防真菌,抑制率都在60%以上;本实验针对最终效果好的菌株提取基因组DNA,然后用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增,并进行形态特征观察,经鉴定分别为厥枝顶孢Acremonium pteridii(HN17434),Albifimbria sp.(HN 17556),Paramyrothecium sp.(HN17261),湖北对漆斑霉Paramyrothecium hubeisis(HN17506),河南葡萄穗霉Stachybotrys henansis(HN17479)。
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