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目的:建立阿里红中总三萜酸的含量测定方法,优化其提取工艺及纯化工艺条件,研究阿里红中总三萜酸纯化产物的急性毒性,研究三萜酸纯化产物的止咳祛痰作用及对慢性支气管炎的治疗效果,为阿里红的进一步研究和临床应用提供理论依据。方法:1.建立含量测定方法以熊果酸为对照品,确定检测波长,采用5%香草醛-冰乙酸溶液、高氯酸溶液显色系统,筛选显色系统条件,采用紫外分光光度法测定样品吸光度,并进行方法学考察。2.提取工艺采用星点设计-效应面法优选阿里红中总三萜酸的提取工艺。采用单因素实验筛选提取次数,以提取时间、溶剂用量、溶剂体积分数为自变量,以阿里红中总三萜酸得率为评价指标,对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选择最佳工艺,并进行预测分析。3.纯化工艺以阿里红中总三萜酸的吸附率及解吸率为指标,考察10种不同型号的大孔吸附树脂对阿里红中总三萜酸的吸附及解吸能力,确定最佳树脂,并优选其纯化条件。4.纯化物结构鉴定采用HPLC-MS对三萜酸纯化产物进行分析,再根据相关文献对比各组分的色谱图及质谱图,初步推测出其中三萜酸种类。5.阿里红中总三萜酸纯化产物的急性毒性研究根据预实验结果,进行LD50的测定,观察小鼠给药后外观,行为的变化,记录分泌物及死亡情况。6.阿里红中总三萜酸的药效学研究6.1采用小鼠氨水引咳法、酚红排泄法进行实验,以镇咳率、祛痰指数为评定指标,观察三萜酸纯化产物止咳祛痰作用效果。6.2脂多糖(LPS)注射入小鼠气管,观察体征,肺大体标本作成病理切片,光镜下观察,确认小鼠慢性支气管炎(CB)模型成功以后,观察三萜酸纯化产物对慢支小鼠肺组织病理形态学的影响。结果:1.含量测定结果显示,熊果酸在0.0019-0.0114 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9995,平均加样回收率为101.08%,RSD为1.13%。2.确定最优提取工艺为提取2次,加13倍量的91%乙醇,每次提取145 min。3.最佳树脂为DM301型大孔吸附树脂,最佳纯化工艺条件是上样液pH值为5,上样液浓度为12.18mg/mL,上样流速为0.6mL/min,最佳上样量2BV,静态吸附时间为1h,用5.5BV pH=8的85%乙醇以0.75mL/min流速洗脱。4.初步推测出三萜酸种类有去氢硫色多孔菌酸、阿里红氨酸、去氢齿孔酸、阿里红酸F、阿里红酸G、阿里红酸E等。5.阿里红中总三萜酸纯化产物有一定的毒性,LD50为7.3440g/Kg。6.阿里红中总三萜酸具有止咳祛痰作用,对慢性支气管炎有治疗效果。结论:阿里红中总三萜酸提取纯化工艺稳定、简便、可行,具有一定的止咳祛痰作用,对慢性支气管炎具有一定的治疗作用。