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恶性肿瘤当前威胁着全世界人类的健康,人类的生活质量也因此严重受到影响。近期许多研究发现,LOX在一些恶性肿瘤中表达升高,认为LOX可能参与肿瘤发生发展、粘附性、恶性转化和侵袭。LOX是一种存在于细胞中的铜依赖性氨基酸氧化酶,它作用于细胞外基质胶原和弹性蛋白的赖氨酸残基,并使其产生分子交联。LOX也是一个乏氧反应基因,在乏氧环境中乏氧诱导因子(HIF-1)可增强LOX m RNA和蛋白的活性,从而促进癌细胞侵袭和转移。本研究采用实时荧光定量PCR法分别检测2种结肠癌细胞株、肺癌细胞株、骨肉瘤和肝癌细胞株经4 Gy的X射线照射后,在0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、24h时间点LOX基因的表达水平。转染p53 si RNA后,采用RT-PCR和Western Blot检测辐射激活的HCT116 p53wt细胞株中LOX m RNA和蛋白表达;转染p53质粒到H1299细胞株后,检测受照后LOX的蛋白表达水平。利用瞬时转染的实验方法将siLOX转染进入肿瘤细胞,采用实时荧光定量PCR法和Western Blot法验证转染效率;采用克隆形成实验,检测LOX沉默联合电离辐射的HCT116 p53wt和HCT116 p53-/-细胞的克隆形成能力。沉默LOX后,采用流式细胞术分析电离辐射诱导的HCT116 p53wt和HCT116 p53-/-细胞的早期凋亡率;沉默LOX后,采用γ-H2AX免疫荧光染色法检测电离辐射诱导的HCT116 p53wt细胞的DNA双链断裂修复能力。构建并鉴定pEGFP-LOX质粒,然后将其转染进入细胞,采用实时荧光定量PCR法验证LOX在H460和HCT116 p53wt细胞中的转染效率;采用计数活细胞的实验方法检测LOX过表达对受照的H460和HCT116 p53wt细胞存活率的影响;过表达LOX后,采用流式细胞术检测电离辐射诱导的H460和HCT116 p53wt细胞的凋亡水平和细胞的G2/M期阻滞,并用Western Blot检测部分凋亡与损伤修复相关因子的蛋白合成水平。阐明LOX调控肿瘤细胞辐射敏感性的分子机制,将有助于建立以LOX调节剂为核心的肿瘤个体化治疗方案。