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研究背景和目的系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus，SLE)是一种累及人体各个器官的自身免疫性疾病，而肾脏是SLE最容易受累的器官。狼疮性肾炎已经成为SLE患者致死致残的主要原因。在众多导致狼疮性肾炎发生和发展的因素中，细胞因子是最重要的因素之一。研究表明，大量细胞因子参与了狼疮性肾炎的免疫炎症反应，致炎细胞因子和抗炎细胞因子之间失衡的程度决定了炎症的严重性和范围。高迁移率族蛋白-1(high mobility group box chromosomal proteinl，HMGB-1)是一种参与细胞核内多种生物学功能的核内蛋白，最新的研究发现它是一种新型的炎性细胞因子。HMGB-1能够激活和趋化炎症细胞，诱导大量细胞因子的分泌。同时，HMGB-1是一种内源性的免疫辅剂，是树突状细胞的成熟过程和Th1细胞的极化过程中的一个调节因子，对于维持Th1和Th2细胞因子之间的平衡有着重要作用。以往的研究已经证实，新型细胞因子HMGB-1和多种自身免疫性疾病相关，并成为关节炎治疗的靶向。本实验旨在明确HMGB-1是否也参与了小鼠狼疮性肾炎的发生和发展。实验材料和方法实验动物为清洁级雌性MRL/lpr转基因小鼠和年龄匹配的雌性C57BL/6J近交系小鼠。分别在6周龄、12周龄和20周龄时将小鼠麻醉后留取血清和肾脏组织标本，进行以下实验：1、对肾组织进行常规HE染色、PAS染色、Masson三色染色，免疫病理检查(IgG+IgM和补体C3)和超微结构检查，以评价小鼠肾脏病理学损害程度。2、用酶联免疫吸附剂测定(Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法检测鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度。3、用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-Polymerase chain reactions，RT-PCR)法检测小鼠肾脏HMGB-1、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和白介素-1β(IL-1β)mRNA表达水平。4、用间接免疫荧光法对HMGB-1在小鼠肾脏中的表达进行定位。实验结果1、MRL/lpr小鼠血清抗dsDNA抗体的滴度随着年龄的增加而上升，明显高于同龄C57BL/6J小鼠。2、随着年龄的增加，MRL/lpr小鼠肾脏的组织病理损害加重，主要表现为急性和亚急性增生性肾小球肾炎。6周龄MRL/lpr小鼠未出现肾脏损害。12周龄出现少量蛋白管型，肾小球系膜细胞和内皮细胞中度增生，间质炎症细胞浸润；20周龄出现大量蛋白管型和重度系膜细胞和内皮细胞增生，并形成新月体。而在任何年龄段的C57BL/6J小鼠中，均未发现其肾脏组织出现明显病理学改变。3、MRL/lpr小鼠肾脏中HMGB-1 mRNA的表达(0.853±0.110)明显高于同龄C57BL/6J小鼠(0.731±0.103)(P＜0.05)，和MCP-1 mRNA的表达量成正相关(r=0.584，P＜0.05)。4、MRL/lpr小鼠的肾脏中HMGB-1蛋白荧光标记呈强阳性，尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达；而在C57BL/6J小鼠肾脏组织中以小管表达为主，肾小球仅小部分呈微弱表达。HMGB1蛋白主要位于细胞的细胞浆和细胞外。5、IL-1βmRNA在已出现肾脏损害的MRL/lpr小鼠肾组织中表达低于同周龄C57BL/6J小鼠。结论据我们所知，本实验首次揭示了新型细胞因子HMGB-1在MRL/lpr小鼠肾脏中的异常升高且分布不同于C57BL/6J小鼠。异常升高和异位表达的HMGB-1可能通过以下途径促进MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎形成：1、HMGB-1可能促进肾组织局部MCP-1的释放，MCP-1和HMGB-1协同趋化炎症细胞向肾小球浸润，从而触发和加重肾小球肾炎；2、HMGB-1可能和增生性肾小球肾炎有关，能促进肾小球细胞增生；3、HMGB-1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能通过结合其受体RAGE而实现。