目的:应用能同时表达三种不同基因——血管内皮生长因子(VEGF)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)、抗凋亡基因(Bcl-xl)的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组腺病毒对胃癌细胞BGC-823进行RNA干扰,探讨该重组腺病毒是否能够同时抑制三个基因在胃癌细胞BGC-823中的表达,并观察该重组腺病毒对胃癌细胞BGC-823的增殖活性及细胞周期的影响。方法:构建能同时表达三种不同的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组腺病毒Ad-shVEGF-shTERT-shBcl-xl,同时构建单独表达上述三个基因的重组腺病毒Ad-shVEGF,Ad-shTERT,Ad-shBcl-xl。培养胃癌细胞BGC-823,将上述四种重组腺病毒同时感染BGC-823细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测目的蛋白的表达。结果:MTT实验显示,与空白对照组比较,感染重组腺病毒后,各实验组细胞增殖活性均下降,同时表达三个基因的重组腺病毒对细胞增殖活性的抑制明显强于单基因组,且随作用时间延长,抑制效应增强。蛋白印迹实验(western blotting)显示,重组腺病毒感染胃癌细胞后,各实验组细胞目的基因的蛋白表达显著下调,同时多基因组目的基因蛋白表达抑制明显强于单基因组。结论:相对于单独沉默一个基因,同时沉默三种不同基因,对胃癌细胞的生长抑制作用更强。RNA干扰同时沉默多个基因是胃癌基因治疗研究的一个新的有效途径。