灰霉病是由灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)引起的一种重要病害,是番茄、辣椒和茄子等茄科作物上的主要病害之一。由于灰葡萄孢菌在遗传上存在异核现象,在自然种群中存在十分丰富的多样性,在药剂选择压作用下,自然存在的抗药性个体极易被筛选而形成抗药性的亚群体,从而导致防治效果下降甚至失效的局面。在众多用于灰霉病化学防治的药剂中,以嘧霉胺(pyrimethanil)为代表的苯胺基嘧啶类杀菌剂是目前应用于灰霉病防治的重要杀菌剂之一。虽然嘧霉胺在国内使用年限不长,但是由于其作用位点单一,田间抗药性已有陆续的报道。为了更有效的控制灰霉病害,延长药剂的使用年限,有必要对药剂的抗性现状和抗性菌株的适应性进行研究。 本研究采用菌丝生长速率法,选用组合培养基(Chapenlnd,1999)测定了来自浙江宁波、金华、嘉兴等不同地区保护地蔬菜上采集分离的48个灰霉病菌菌株对嘧霉胺的抗性,发现高抗菌株4个(占8.33%),中抗菌株2个(占4.17%),低抗菌株6个(占12.5%),敏感菌株36个(占75%)。抗性菌株在无药培养基上经10代继代培养后,再进行抗性评价,发现其抗嘧霉胺特性能稳定遗传。 选取对嘧霉胺敏感性不同的灰葡萄孢菌菌株BC-T-4-28(S)、BC-T-4-69(MR)和BC-T-1-37(HR),分别对这些菌株的菌丝扩展速率、菌丝干重、产孢和胞外酶(果胶酶和纤维素酶)活性等生理生化指标进行了比较。结果表明:不同敏感性的灰霉菌株之间菌丝扩展速率、菌丝干重和产孢量,随着抗性的增加都有一定程度的减小。对不同敏感性的灰葡萄孢菌菌株的致病性的研究也表明,敏感性不同的灰葡萄孢菌菌株之间致病性随抗药性的增加也有一定程度的减少。通过对果胶酶和纤维素酶活性的测定,我们得到抗性不同的灰霉菌株果胶酶活力和纤维素酶活力随着抗性的增加酶活力都呈减小趋势,这一结果与嘧霉胺的抑制之一抑制病菌胞外酶分泌相一致。 众多研究报道表明,灰霉病菌株系间存在较大遗传学差异和形态学上的差异。灰葡萄孢至少由两种不同的同域亲缘种(sympatric sibling species)组成,区别是转位因子Boty和Flipper的有无。含有转座子Boty和Flipper的称为transposa,不含