硒化环糊精的制备、表征及初步分子药理研究

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谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)又称硒谷胱甘肽过氧化物酶,是机体内广泛存在的一种清除H2O2和许多有机氢过氧化物的过氧化物分解酶,它能催化谷胱甘肽和过氧化物之间的氧化还原反应,将过氧化物还原成低毒的羟基化合物,保护细胞膜的结构和功能不受过氧化物的损害。由于天然GPX的不稳定性和局限性,导致其利用率很低,因此开发具有高活性的人工模拟物成为研究的热点。利用β-环糊精(β-CD)骨架构建的2-硒桥-β-环糊精(2-SeCD),是一个人工合成的GPX模拟物,与其他小分子模拟物相比,它具有较高的GPX活性,有一定的抗氧化活性和保护细胞免受抗氧化损伤的作用。在以前的研究中,高浓度的2-SeCD在体外实验中可以诱导HeLa细胞凋亡,而且2-SeCD的存在不会对正常的PBMC细胞产生毒性,但低浓度的2-SeCD又可以抑制HeLa细胞的凋亡,这时,2-SeCD在细胞中就起到了抗氧化、保护细胞并维持细胞正常生理功能的作用。我们延续上述研究,首先人工合成了2-SeCD,首次测定出其单位时间内催化反应速度为0.093μM/min,之后我们建立了HeLa细胞、HepG-2细胞和NCM460细胞模型,分别以β-CD和Ebselen作为对照,观察了低浓度(50μM、25μM、12.5μM、5μM、1μM)和高浓度(750μM、500μM、250μM、125μM、62.5μM)的2-SeCD、β-CD和Ebselen对三种细胞生长的抑制作用。我们发现,高浓度的2-SeCD对体外培养的HeLa细胞和HepG-2细胞的增殖均有抑制作用,而公认的小分子GPX模拟物Ebselen在高浓度下对HepG-2细胞的致死率则没有2-SeCD高,期间我们还发现作为正常非肿瘤细胞的NCM460在2-SeCD高浓度下也发生了细胞增殖的抑制现象;当处于低浓度时,2-SeCD和Ebselen均抑制了HeLa细胞和HepG-2细胞的凋亡,但Ebselen在低剂量下明显促进细胞生长,所以在细胞增殖对药物剂量性依赖的过程中,2-SeCD对肿瘤细胞增殖的影响更小,而NCM460细胞在2-SeCD低剂量下也出现了细胞增殖的现象,这与肿瘤细胞的结果相同。结果表明,2-SeCD对HeLa细胞和HepG-2细胞的生长具有双重调节的作用,但在高剂量时依然对正常的人结肠上皮细胞NCM460的增殖有抑制的作用,具体机制还须再深入探讨。总之,2-SeCD的这种对肿瘤细胞的双重调节作用在肿瘤的预防和治疗中具有重要的作用。
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