目的对于食品中阿维菌素类药物残留的监测,在色谱分析之前,往往需要通过固相萃取前处理以去除杂质、浓缩目标物。为了克服传统固相萃取离线操作自动化程度低、吸附剂难以重复使用等缺点,本论文建立一种可重复使用的疏水整体柱在线固相萃取结合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS),同时、快速分析动植物源性食品中5种阿维菌素类药物残留的方法。方法1通过原位聚合制备疏水聚(甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯)(poly(BMA-co-EDMA))(10 mm×2.1 mm,id)整体柱,考察反应时间(2~24h)和反应温度(55~65℃)对整体柱疏水性能的影响,并对其通透性、机械强度和表面形貌进行表征。2将最优条件下制得的poly(BMA-co-EDMA)整体柱作为在线固相萃取吸附剂,用于动物源性(牛肉、牛肝和牛奶)和植物源性(鲜梨和辣椒)食品中5种阿维菌素类药物残留的前处理。实验考察了在线固相萃取主要参数的影响,包括上样流动相种类(5 mmol/L和10 mmol/L乙酸铵缓冲溶液、0.1%和0.5%甲酸溶液)、洗脱流动相种类(甲醇、乙腈)和洗脱流速(0.3~0.8m L/min)。3经poly(BMA-co-EDMA)整体柱富集净化后的5种阿维菌素类药物直接洗脱至C18分析柱进行液相色谱串联质谱分析,实验对分离流动相的种类(乙腈-0.5%甲酸溶液、乙腈-0.1%氨水溶液)、乙腈初始比例(80%~10%)以及质谱条件进行了优化。4在最佳实验条件下,测定基质效应、特异性、检出限、定量限、线性范围和回收率等指标。此外,通过同一根poly(BMA-co-EDMA)整体柱不同使用次数、以及相同批次和不同批次合成的整体柱对阿维菌素固相萃取得到的色谱峰峰面积计算相对标准偏差,评价该吸附剂的使用寿命和重现性。结果1实验表明,在考察条件下,随着反应时间的增长和反应温度的提高,poly(BMA-co-EDMA)整体柱疏水作用无显著变化。选择整体柱合成条件为55℃水浴反应4 h,该柱柱床均匀、连续多孔,其柱压与操作流速呈现良好线性关系(r=0.999)。2将poly(BMA-co-EDMA)整体柱用作在线固相萃取吸附剂,实验以10 mmol/L乙酸铵缓冲溶液为上样流动相,在流速为0.5 m L/min条件下以乙腈为洗脱流动相将目标物洗脱并转移至C18分析柱。3在LC-MS/MS分析时,为了获得高灵敏度,选择乙腈-0.1%氨水溶液为梯度洗脱流动相并确定乙腈初始比例为10%。4方法对食品中5种阿维菌素类药物残留的分析时间为15 min,在1~100μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995),对5种阿维菌素类药物检出限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。在5.0、10.0、50.0μg/kg三个添加水平的回收率为71.8%~101.3%,日内和日间相对标准偏差≤8.94%。同一根整体柱第1次、第250次和第500次使用,阿维菌素色谱峰峰面积的相对标准偏差为5.4%;使用相同批次和不同批次合成的poly(BMA-co-EDMA)整体柱,得到阿维菌素色谱峰峰面积的相对标准偏差分别为6.3%和9.3%。结论基于疏水整体柱在线固相萃取结合液相色谱串联质谱分析,建立了动植物源性食品中5种阿维菌素类药物残留同时测定的方法,满足食品中阿维菌素类药物的常规分析测定要求。方法自动化程度高,在线测定提高了方法的重现性和准确度;分析速度快,离线方法仅固相萃取就需要耗时2 h以上,而本方法对食品样品的前处理和分析测定过程总共只需15 min;疏水整体柱制备简单,重复性良好,可达500次以上,并且对动植物源性食品均具有良好的富集净化效果。