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背景与目的逐年来肺癌发病率可谓有增无已,其死亡率之高也在各类癌症排行榜单中名列前茅。为了战胜肺癌,人类从未放缓探究先进、有效疗法的脚步。在看到不俗成绩的同时我们也清楚,肺癌治疗仍存有较大进步、发展的空间,等待我们去用心填补。小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)据悉仅占各类肺癌总数五分之一左右,但考虑它早期即可转移、侵袭扩散范围较广、复发几率较大等特性,SCLC仍是临床上最难攻克、最不愿面对的恶性病变之一。放化疗是SCLC的经典、常规疗法,但是客观来说该疗法不仅疗效较为有限、易继发强耐药,还会诱发、伴随令病患身心受创的毒副作用。针对眼下这种状况,研发探求一种全新的、疗效优异的、毒副作用小的药物已迫在眉睫。门冬酰胺酶(asparaginase,AN)是以氨基酸代谢疗法为依托的代表性酶疗药物。目前AN已经在多篇肿瘤相关的文献报道中亮相,揭示其独特的、高效的药用价值。尤其值得一提的是,在遥远的20世纪70年代中期AN就已逐步应用于白血病的一线临床。既然AN对于血液肿瘤,甚至对多种实体瘤都具有如此夺目疗效,那么对于SCLC而言AN是否同样具有药用价值呢?目前尚未发现相关针对性报道。本课题组为了验证AN对小细胞肺癌疗效,甄选两株SCLC细胞系——H1688、H446为实验对象进行连续性研究,旨在为AN治疗SCLC提供基础理论依据,也为相关转化医学的系统研究提供参考。研究方法通过MTT法检测AN单用或联用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)后H1688和H446细胞的增殖抑制率;通过台盼蓝染色法检测AN单用或联用CQ后H1688和H446细胞的死亡率;免疫荧光法观察AN作用后自噬标记物LC 3蛋白表达并示踪自噬体形成;Western blot检测AN干预H1688细胞后自噬相关蛋白LC 3和AKT/mTOR信号通路蛋白mTOR、AKT、70S6K表达。结果AN可以抑制H1688和H446细胞增殖、促进其死亡,且呈浓度依赖性(p<0.05);AN处理后可以明显增加H1688和H446细胞自噬小体数量,诱导LC3-II表达;CQ可以增强AN对H1688和H446细胞的杀伤作用(p<0.05);AN干预H1688细胞后p-mTOR、p-Akt、p-70S6K蛋白表达水平有所降低。结论(1)AN可以抑制H1688和H446细胞生长;(2)AN可以诱导H1688和H446细胞自噬;(3)阻断自噬可以增强AN对H1688和H446的细胞毒性作用;(4)AKT/mTOR参与了AN所诱导的H1688和H446细胞自噬。