利用Northern blot杂交和PAL酶鉴定水稻品种的化感潜力

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利用水稻化感作用特性,筛选出化感品种,培育优良抗草品种,可以大大减少环境污染和农业生产的成本.该文用水培法对中国的44个水稻品种做了化感活性的评价,其中7个品种显著抑制稗草根的生长,它们是:特籼占13、玉粳占、澳山丝苗、朝二占J、无名优质种、粳籼89、丰澳占.测定国际水稻所12个水稻品种的叶鞘和叶水浸提液对稗草幼苗生长的影响,发现12个品种的叶片水提取物对稗草的抑制作用均显著强于叶鞘水提取物的抑制作用.水淋溶的化感物质主要存在于叶片中.测定这12个水稻品种二叶期、三叶期、四叶期叶片水浸提液化感活性和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,结果表明,三叶期的的化感活性显著高于四叶期,四叶期的化感活性显著高于二叶期.三叶期叶的酶活性显著高于二叶期和四叶期叶的酶活性,二叶期和四叶期的酶活性无显著差异.二叶期和三叶期鞘的PAL酶活性都明显高于同一时期叶的酶活性,叶鞘中的PAL酶活性是叶片中PAL酶活性的2.7~23.5倍.四叶期叶的酶活性和四叶期叶浸提液的化感影响因子R呈显著负相关(a=0.05).对其中6个品种二叶期的叶鞘和叶分别提取总RNA,用编码PAL酶的一段DNA序列做探针,与叶鞘和叶中的mRNA做Northen Blot杂交,6个品种叶片中的PAL酶的mRNA表达量均较少,无法区别品种之间的信号差异,但是叶鞘中PAL的mRNA的表达量比叶中要大的多,四个品种的叶鞘的PAL酶活性的大小与其mRNA表达量有明显的对应关系,即叶鞘中酶活性强的品种,其Northen Blot杂交的mRNA的表达量大.因此,用Northen blot杂交方法鉴定化感活性的大小以及利用其筛选水稻化感品种是有可能的.该研究为利用分子生物学方法直接筛选化感品种奠定了基础.
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