背景急性肝损伤是指病毒感染、肝毒性药物、有毒化学物质和肝缺血再灌注等因素导致的急性肝功能异常。其发病机制复杂,涉及氧化应激、肝细胞凋亡和坏死,是许多肝脏疾病的起始因子和共同途径;如果不能及时控制,有可能进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌,这些疾病对身体有严重的影响。诱导急性肝损伤的因素有很多,主要有肝炎病毒、过量药物和化学毒素,对于轻中度的肝损伤,肝细胞可发生再生、坏死和凋亡,这个过程与肝脏炎症有关。Krüppel样转录因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4）是具有锌指结构的转录因子,其羧基末端的特征性锌指结构能够与DNA的CACCC元件和富含GC的区域结合,从而调控转录的激活或抑制;而其氨基末端是高度弥散的,可结合不同的激活因子,导致功能的多样性。其基本生物学功能是通过对下游基因的控制,在细胞周期调控、细胞增殖、分化、凋亡和炎症等生理和病理过程中发挥重要作用。研究表明,KLF4过表达能够抑制肝脏发生肝纤维化/肝硬化,是肝纤维化/肝硬化的抑制因子。KLF4还能够通过多种途径抑制成纤维细胞的激活,从而抑制纤维化和肿瘤的发生和发展。Apelin是一种重要的生物活性肽,是G蛋白偶联受体APJ唯一的内源性配体。它可以通过自分泌和旁分泌的方式激活APJ受体,并与其结合而发挥病理学和生理学功能。Apelin在许多器官的生理学、病理生理学以及促炎和血管生成中起重要作用,但是其在急性肝脏疾病中的作用尚不清楚。有研究发现apelin在肝脏内主要表达在活化的肝星状细胞中,具有促炎和促纤维化的作用,说明apelin的活化可能跟肝损伤有一定关联。有关KLF4和apelin在急性肝损伤中的研究至今尚未有报道,我们观察到在肝脏发生急性损伤后,KLF4的表达量是减少的,而apelin的表达量明显增加,由此我们联想到在急性损伤的肝脏中,KLF4和apelin可能存在某种相互作用和关联。目的本研究的目的是探讨KLF4和apelin在急性损伤的肝脏中的相互作用和影响,验证KLF4因子能否通过抑制apelin而对肝脏起到保护作用,探索急性肝脏疾病发展过程中新的研究方向。方法选择小鼠品系为C57BL/6,周龄为6-8周,体重25g左右野生雄性小鼠构建动物模型。模型I:小鼠随机分为2组:正常对照组,CCl₄损伤组。CCl₄损伤组经腹腔注射0.2%CCl₄（10ml/kg）,对照组注射相同剂量的橄榄油。24小时后,取血,检测小鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性;将小鼠经左心室灌注4℃预冷PBS后,取肝脏,一部分肝脏组织经一系列方式处理后,做HE染色,从形态学方面来观察小鼠肝脏损伤程度。做免疫组化来检测KLF4和apelin在小鼠受损肝脏中的表达情况。另一部分组织经超声破碎提取总mRNA和总蛋白,从基因和蛋白质方面检测在肝脏发生急性损伤后KLF4和apelin的表达水平的变化。模型II:野生雄性小鼠随机分为4组:GFP组,KLF4组,GFP+CCl₄组,KLF4+CCl₄组。第一天按各组设计要求GFP组和GFP+CCl₄组通过小鼠尾静脉注射GFP质粒（0.5mg/kg质粒+1.2ml生理盐水）,KLF4组和KLF4+CCl₄组通过小鼠尾静脉注射KLF4质粒（0.5mg/kg质粒+1.2ml生理盐水）,第三天相同时间按照第一天的方法和剂量再通过尾静脉注射相应质粒一次,第四天前两组经腹腔注射橄榄油（10ml/kg）,后两组腹腔注射0.2%CCl4+橄榄油（10ml/kg）。24小时后,处理方式和实验方法同模型I。结果1.经0.2%CCl₄处理后,经HE染色结果和检测血清ALT/AST结果可知,小鼠肝脏发生急性损伤。2.与正常对照组相比,CCl₄损伤组KLF4表达量降低,apelin表达量上升。3.经HE染色结果和检测血清ALT/AST结果可知,KLF4+CCl₄治疗组肝脏损伤情况比GFP+CCl₄损伤组明显减轻。4.KLF4+CCl₄治疗组KLF4的表达量明显比GFP+CCl₄损伤组高,而apelin则相反。结论1.在急性肝损伤中,apelin的表达明显上升,KLF4的表达明显下降,apelin和KLF4与肝脏损伤均有密切关联。2.在急性肝损伤中,KLF4通过抑制apelin的表达而阻止肝脏损伤的进展,对肝脏起到一定的保护作用。