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本文以蛇足石杉无菌苗为材料,通过对其组织培养快速繁殖关键技术及石杉碱甲合成调控的研究,旨在建立蛇足石杉组织培养快繁体系,并筛选出对石杉碱甲合成调控有显著促效反应的外源添加物及其适用浓度。取得的研究结果如下: (1)建立了一套完整的蛇足石杉组织培养快繁体系。 以1/4MS矿质元素和1/2MS有机成分为基本培养基,通过考察不同浓度激素组合对不定芽诱导的影响,优选出诱导蛇足石杉不定芽发生的最佳激素组合是0.3 mg/L6-BA和0.05 mg/L NAA。在此激素组合下,培养3个月后不定芽发生率为93.3％,平均不定芽数为7.0个。 不定芽在基本培养基上可完全直接分化成丛生苗,且无机氮源影响丛生苗的继代生长,最适丛生苗生长的氮源是总氮浓度为15mmol/L、NH4+/NO3-为1:5。 适宜蛇足石杉丛生苗生根的培养基为附加2mg/L IBA的基本培养基,培养2月后生根率达100%,平均根长16.0mm,移栽60 d后成活率为80%。 (2)比较了不同有机添加物对蛇足石杉丛生苗石杉碱甲合成的调节作用赖氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸3种前体氨基酸对蛇足石杉丛生苗生长和石杉碱甲合成具有不同的调节作用,以1.0mmol/L苯丙氨酸的综合促进效应最好,培养5周时,丛生苗干重增长率为29.35%,石杉碱甲含量为0.1334%,石杉碱甲产率为0.4793mg/L,分别比对照高25.8%、55.7%和96.2%。 硝普钠作为非生物诱导子一氧化氮的供体,当浓度为10μmol/L时,对蛇足石杉丛生苗生物量及石杉碱甲含量具有较好的促进效果,但水杨酸在实验浓度范围内明显抑制蛇足石杉丛生苗的生长及石杉碱甲的合成。 生物诱导子石斛寡糖素可有效促进蛇足石杉丛生苗生物量积累及石杉碱甲合成,当石斛寡糖素浓度为40mg/L时,培养5周的蛇足石杉丛生苗干重增长率达29.96%,石杉碱甲含量为0.1285%,产率达0.4712mg/L。