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目的:检测新合成的一种靛玉红衍生物，N-乙基-1-氧代靛玉红(N-Ethyl-1-oxindirubin，E-1-OI)在体抑瘤效果、离体肿瘤细胞毒性及其可能的作用机制。 方法:用MTT实验测定E-1-OI对不同肿瘤细胞(HeLa、HCT116和HepG2)的毒性，并计算半数抑制率(IC50)。用HepS移植瘤模型测定E-1-OI的在体抗肿瘤活性。对肿瘤组织进行TUNEL染色，用western blot检测了肿瘤组织中PARP、caspase-3、PCNA(proliferating cell nuclear antigen)和p-STAT3(phospho-transcription factor signal transducer and activator of transcription3)蛋白的表达，免疫组化分析肿瘤组织中PCNA和p-STAT3的表达，以研究E-1-OI抑制HepS移植瘤生长的机制。对荷瘤小鼠的体重及其免疫器官指数进行测定，分析E-1-OI的毒性作用。用HepG2细胞进行E-1-OI的机制研究。用PI染色法测定细胞周期，AnnexinⅤ/PI双染色法测定细胞凋亡，JC-1染色法测定细胞线粒体膜电位，Western blot测定线粒体介导细胞凋亡通路中相关蛋白细胞色素C、PARP、caspase-3、caspase-7、caspase-9、Bcl-2和Bax的表达，DCFH-DA荧光探针测定细胞内ROS的水平。 结果:首先发现E-1-OI对HeLa、HCT116和HepG2细胞均呈现较为明显的增殖抑制作用。其中，HepG2细胞对于E-1-OI反应更为敏感。细胞形态学的观察结果可以发现，E-1-OI可以时间浓度依赖性地抑制HepG2细胞的增殖。其次，E-1-OI(40 mg/kg)不仅能够抑制HepS移植瘤体积的增大，而且能够减轻肿瘤重量，对HepS移植瘤的抑制率为59.40％，其抗肿瘤效应接近阳性对照药5-FU(抑制率为56.55％)，明显高于靛玉红(40 mg/kg)（抑制率仅为5.60％）。除此之外，TUNEL分析实验的结果表明，E-1-OI能够诱导HepS移植瘤细胞发生凋亡。在HepS移植瘤中，E-1-OI通过诱导PARP蛋白出现裂解，降低caspase-3前体蛋白procaspase-3的水平发挥其在体诱导肿瘤细胞发生细胞凋亡的作用。再者，在western blot实验结果中发现，与对照组和靛玉红处理组(40 mg/kg)相比，E-1-OI处理组的PCNA和p-STAT3蛋白表达水平呈浓度依赖性降低。这一实验结果与免疫组化分析的结果一致，均表明E-1-OI可以抑制肿瘤细胞的增殖。E-1-OI不仅对荷瘤小鼠的体重未产生明显影响，而且未显示出明显的免疫抑制毒性。在培养的HepG2细胞上还观察到E-1-OI和阳性对照药紫杉醇一样均可诱导HepG2细胞出现G2/M阻滞。在10、20和40μM E-1-OI作用下，HepG2细胞早期凋亡率由3.1％分别上升至7.0％、33.6％和82.5％。随着E-1-OI给药浓度的增加，细胞的早期凋亡率呈上升趋势。在E-1-OI诱导HepG2细胞发生细胞凋亡这一过程中，同时还出现了HepG2细胞线粒体膜电位的降低和细胞色素C由线粒体释放至胞浆的现象。随着E-1-OI给药浓度的增高，除了PARP蛋白出现裂解，线粒体介导的细胞凋亡通路中的凋亡执行蛋白——caspase-9、caspase-7、caspase-3均裂解为活性片段。再者，用E-1-OI处理细胞24 h后发现，随着给药浓度的增高，促凋亡蛋白Bax的表达增加，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达降低。还发现E-1-OI会诱导HepG2细胞内活性氧(reactive oxygenspecies，ROS)水平上升。但是，当用ROS清除剂NAC(N-acetyl cysteine)作用于给药细胞后，可部分逆转40μM E-1-OI所引起的细胞增殖抑制和线粒体膜电位降低。除此之外，NAC能够部分降低由40μM E-1-OI所诱导的PARP的裂解和Bax的蛋白表达，可以逆转procaspase-9、procaspase-7、procaspase-3和Bcl-2蛋白表达水平的降低。 结论:实验结果表明E-1-OI具有良好的抗肿瘤作用。它能够诱导肿瘤细胞发生细胞周期阻滞和线粒体依赖性的细胞凋亡。而且E-1-OI所介导的细胞凋亡与氧化应激密切相关。此研究结果为继续深入研究E-1-OI——这一具有良好抗肿瘤效果的药物提供了实验依据。