【摘 要】
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目的:1、研究甲氨喋呤-偕二磷酸偶联物的最佳合成方法,使合成的偶联物同时具备骨靶向性和化疗药物本身的细胞毒性,并通过核磁共振等仪器对新化合物进行鉴定,确保其分子结构与
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目的:1、研究甲氨喋呤-偕二磷酸偶联物的最佳合成方法,使合成的偶联物同时具备骨靶向性和化疗药物本身的细胞毒性,并通过核磁共振等仪器对新化合物进行鉴定,确保其分子结构与原药相同;用偶联物进行体外骨靶向性试验,证明该目标化合物对羟基磷灰石有良好吸附性。2、用不同浓度的偶联药物作用于体外培养的人成骨细胞,研究在不同浓度下偶联物对成骨细胞的细胞活力、平板克隆形成及MTT实验等的影响;体外培养人成骨肉瘤系MG-63,通过形态学观察、流式细胞术及原位末端标记(TUNEL)等方法,研究该偶联物对骨肉瘤细胞是否具有抑制增殖及诱导凋亡的作用。3、建立BALB/C-nu/nu裸鼠成骨肉瘤动物模型,观察偶联物对肿瘤的抑制作用及对主要脏器的毒副作用,研究该药物对骨肉瘤的抑瘤作用。 方法:1、药物合成、鉴定及体外靶向实验 我们采用含功能基团的偕二膦酸四苄基酯化合物与甲氨喋呤偶联,得到甲氨喋呤-偕二膦酸四苄基酯后,再通过催化氢化解离去掉苄基,最终得到游离的甲氨喋呤-偕二膦酸偶联物;称取定量的羟基磷灰石,分别加入不同浓度的甲氨蝶呤和偶联物,随后用紫外分光仪对溶液进行测定分析,确定偶联物是否对羟基磷灰石具有吸附作用。2、偶联物对细胞的毒性实验(1)术中取人髂
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