中国强毒钩端螺旋体膜蛋白基因克隆、原核和真核细胞表达及基因免疫研究

来源 :华西医科大学 四川大学华西医学中心 四川大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ouyang0078
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近年来,钩端螺旋体病(简称钩体病)在全世界仍然保持较高的发病率和危险流行危险.该研究以其为靶抗原进行钩体DNA疫苗的初步研究.研究人员首先通过PCR方法,从强毒力赖型017株钩体基因组中扩增出OmpL1基因,将其克隆入原核真核穿梭质粒载体pBK-CMV,经筛选鉴定出重组质粒pAC-OmpL1.测序结果表明,所克隆的基因与另一个报道过的流感伤寒型L.alstoni株钩体OmpL1基因高度同源,从碱基水平上确证所获取基因为赖型017株钩体的OmpL1基因.然后以IPTG诱导带重组质粒菌表达,结果表达出37kd的特异性OmpL1融合蛋白,由于其对宿主菌有毒性效性,因而表达量较低.该研究对赖型017株钩体OmpL1蛋白基因的重组、序列分析和真核、原核细胞中的表达以及对动物的基因免疫研究,为我国致病性钩体的基因免疫研究提出了重要的实验资料,为发展中国新一代钩体病基因疫苗奠定了基础.
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