本研究采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型，研究了全脑缺血中N0和JNKs的相互作用：同时研究了NO的供体SNAP以及nNOS的抑制剂7-NI和iNOS的抑制剂AMT对缺血性脑损伤的保护作用，为NO在临床上用来治疗缺血性脑损伤方面的疾病，提供了一定的理论基础和科学依据。 1．在脑缺血再灌早期NO抑制了JNKs磷酸化 本实验室的研究已证明脑缺血再灌30分钟，海马中JNKs的磷酸化存在一个明显高峰，再灌6小时c-Jun的磷酸化存在一个高峰。为了研究脑缺血再灌早期NO与JNKs之间的关系，在实验我们采用了SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型，以免疫印迹和免疫沉淀的方法研究了脑缺血再灌后海马中JNKs和c-Jun的磷酸化情况。为了探讨在脑缺血再灌早期内源性N0能否抑制JNKs和c-Jun的磷酸化，在缺血前20分钟给7-NI一次，发现可以明显增强脑缺血再灌30分钟时JNKs的磷酸化及再灌6小时的c-Jun的磷酸化。为了探讨在脑缺血再灌早期外源性NO能否抑制JNKs和c-Jun的磷酸化，在缺血前20分钟给SNAP一次，发现可以明显抑制脑缺血再灌30分钟时JNKs的磷酸化及再灌6小时的c-Jun的磷酸化。结果提示：在脑缺血再灌早期内源性NO和外源性NO都能够抑制JNKs和c-Jun的磷酸化。 2．在脑缺血再灌晚期NO抑制了JNKs的磷酸化 本实验室的研究已证明脑缺血再灌3天，海马中JNKs的磷酸化有一个明显高峰。为了研究在脑缺血再灌晚期NO对JNKs磷酸化的影响，我们在缺血前20分钟给7-NI，发现同在缺血前给AMT一次一样，对再灌3天时的JNKs的磷酸化没有影响；在缺血前20分钟给SNAP一次对再灌3天时的JNKs的磷酸化也没有影响。结果提示：内源性和外源性NO通过缺血前一次给药对脑缺血再灌晚期JNKs的磷酸化都没有影响。于是，在缺血前20分钟给SNAP一次并且在缺血再灌3天内每12小时给药一次，发现对再灌3天时的JNKs的磷酸化有抑制作用。结果提示：脑缺血再灌晚期NO能够抑制JNKs的磷酸化。 3．SNAP对脑缺血再灌引起的海马CAl区神经元损伤的保护作用 为了探讨NO的供体SNAP对脑缺血再灌引起的海马CAl区神经元损伤是否存在保护作用，采用焦油紫染色的方法研究了海马CAl区神经元的存活情况。研究结果显示：在缺血前20分钟给SNAP一次对脑缺血再灌引起的神经元损伤没有保护作用；如果在缺血前20分钟给SNAP一次，并且在再灌的3天内每12小时给药一次对海马CAl区神经元存在很好的保护作用。结果提示：连续7次给NO的供体SNAP对脑缺血再灌引起的海马CAl区神经元损伤具有保护作用。 4.7-NI和AMT对脑缺血再灌引起的海马CAl区神经元损伤的保护作用 为了探讨nNOS的抑制剂7-NI和iNOS的抑制剂AMT对脑缺血再灌引起的海马CAl区神经元损伤是否存在保护作用，采用焦油紫染色的方法研究了海马CAl区神经元的存活情况。研究结果显示：在缺血前20分钟给7-NI一次对脑缺血再灌引起的神经元损伤保护作用比较明显；如果在缺血前20分钟给AMT一次，对脑缺血再灌引起的神经元损伤保护作用非常明显。结果提示：在脑缺血再灌引起的海马CAI区神经元损伤中，iNOS的作用比nNOS的作用更加显著。