衰老和慢性疾病引发的肌肉减少症、恶病质等使病患体内成肌分化受到抑制,骨骼肌质量和力量丢失,严重降低病患生活质量。据报道,茶叶中的主要活性成分儿茶素可通过促进骨骼肌干细胞分化来增强骨骼肌性能的功效,但已有研究未对4种主要儿茶素单体表儿茶素(Epicatechin,EC),表儿茶素没食子酸酯(Epicatechin gallate,ECG),表没食子酸酯儿茶素(Epigallocatechin,EGC)以及表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)的促成肌分化活性进行系统比较,其发挥活性作用的分子机制也有待深入挖掘。本研究主要进行EC、ECG、EGC和EGCG的促成肌分化活性筛选工作,并进一步探索和阐明其发挥促分化活性的量效关系与作用机制。主要研究结果如下:1.采用不同浓度儿茶素单体干预小鼠骨骼肌成肌细胞(C2C12细胞)分化,统计分化成熟的肌管数量、长度和直径,并检测肌管分化标志因子MyOG、MyOD、MyHC的mRNA表达,从细胞表型和基因表达水平两方面评估EC、ECG、EGC和EGCG促进成肌细胞分化活性的强弱。结果表明ECG较其他儿茶素单体表现出更强的增强骨骼肌干细胞分化能力,且ECG作用成肌分化的最佳浓度为10μM。2.利用原子力显微镜探索ECG对肌管细胞粘附力、刚度和杨氏模量等力学特性的影响。发现ECG显著增加肌管细胞的高度(增幅约为178.5%),降低肌管细胞的粘附力、刚度和杨氏模量(分别降至对照组的27.9%,25.1%和56.4%)。3.利用LC-MS/MS蛋白质组学联合IPA分析探讨ECG增强C2C12细胞分化的分子机制,发现ECG通过mTOR和Wnt/β-catenin信号通路发挥促分化活性。