西花蓟马对多杀霉素抗性近等基因系的建立及抗性机制研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanfenng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)是一种世界性的重要农业害虫,可以通过其锉吸式口器取食,并且能够在植物间传播病毒造成间接危害。由于西花蓟马具有体型小、隐蔽性强、繁殖力高、孤雌生殖、生活史短等特点,使其很容易对杀虫剂产生抗性,田间防治困难。多杀霉素属于大环内酯类杀虫剂,是刺糖多孢菌有氧发酵后的次级代谢产物,是一类对环境和非靶标动物友好的生物源农药。多杀霉素的主要作用靶标为烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs),次要靶标为γ-氨基丁酸受体(GABA)。尽管多杀霉素类是目前防治蓟马类害虫最为有效的药剂之一,但已有多例田间抗性的报道,研究其对多杀霉素的抗性机制对于西花蓟马的防治和抗性治理具有重要意义。本研究测定了6个西花蓟马田间种群对7种杀虫剂的抗药性,建立了西花蓟马对多杀霉素抗性的近等基因系,建立了nAChR a6亚基缺失型转录本比例与多杀霉素抗性水平的线性模型,并用田间种群进行了验证,研究了叶用莴苣上西花蓟马的防治指标。  1.西花蓟马田间种群对不同药剂的抗药性测定  2016年测定了北京海淀和延庆、河北石家庄、云南元谋和上蒜、西藏拉萨6个地区的西花蓟马对多杀霉素、乙基多杀霉素、溴虫腈、高效氯氰菊酯、噻虫嗪、阿维菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)的抗药性。结果表明所有种群对多杀霉素和乙基多杀霉素产生了不同程度的抗药性,其中北京海淀种群对乙基多杀霉素的抗性水平高达2395倍,建议停止使用该类药剂;对阿维菌素类药剂的抗性水平在不同种群之间差异大,建议减少使用;除西藏种群外,其他种群对溴虫腈较为敏感,且溴虫腈的毒力较高,推荐使用;对高效氯氰菊酯和噻虫嗪的敏感性呈上升趋势,建议合理使用。云南上蒜地区西花蓟马的抗药性问题最为严重,对甲维盐、阿维菌素、乙基多杀霉素和多杀霉素均达到极高抗水平,其中对甲维盐的抗性水平超过4000倍。建议各地根据抗性水平和药剂的毒力合理选择药剂,并集成建立综合防治措施。  2.叶用莴苣上西花蓟马的防治指标研究  采用人工接虫的方法,分别于春、秋季进行2次试验,研究西花蓟马虫口密度与叶用莴苣产量损失率之间的关系。线性回归分析结果表明,西花蓟马虫口密度与叶用莴苣产量损失率之间呈显著正相关;大棚种植叶用莴苣,西花蓟马的防治指标为5-6头·株-1,即当每株叶用莴苣上西花蓟马虫口数达到5-6头时,叶用莴苣产量显著降低,应及时进行防治。  3.西花蓟马抗多杀霉素的近等基因系建立  通过8代回交,获得了西花蓟马对多杀霉素抗性的近等基因系种群NIL-R。对遗传相似度的检测结果表明,敏感亲本Ivf03与抗性亲本Spin-R的遗传相似度为0.6395,此后随着回交次数的增加而不断增大,最终的近等基因系抗性种群NIL-R与敏感亲本Ivf03的遗传相似度达到了0.9890,且生物测定结果表明NIL-R对多杀霉素的抗性倍数为36,000倍,与抗性亲本Spin-R的抗性水平相当。此外还筛选出了8条在西花蓟马中具有稳定的多态性扩增的ISSR引物,并设计正交试验,对西花蓟马ISSR-PCR的反应体系进行了优化。体系优化的结果表明,体系各因素对扩增结果的影响从大到小依次为:dNTPs浓度>引物浓度>Taq酶含量>DNA含量>Mg2+浓度;最佳反应体系为1.0 mmol·L-1 Mg2+,0.25 mmol·L-1 dNTPs,2μmol·L-1引物,0.5 U的Taq DNA聚合酶以及30 ng模板DNA。  4.西花蓟马多杀霉素抗性机理研究  在室内建立了5个西花蓟马对多杀霉素不同抗性水平的品系,利用RT-PCR和大量测序获得5个种群的nAChR a6亚基的转录本,建立了缺失型转录本比例与对多杀霉素抗性水平之间的关系。结果表明a6亚基缺失型转录本的比例与抗性倍数之间存在线性关系,回归方程为:y=5.4392x-1.2038,相关系数R2=0.9765。说明西花蓟马对多杀霉素的抗性水平越高,缺失型转录本所占的比例越多,因此推测nAChR a6亚基的功能性缺失突变是西花蓟马多杀霉素抗性形成的分子机制。用5个不同地区的西花蓟马田间种群对该模型进行验证,所得卡方值为0.2914(x2=0.2914<x23,0.05=7.815),说明田间种群数据与模型预测数据之间无显著差异,该模型同样适用于田间情况,可作为田间多杀霉素抗性监测的分子诊断方法。
其他文献
随着经济全球化的迅猛发展和持续深入,食品安全问题变得越来越广泛,如此会严重影响到社会的发展和进步.在这种情况下,食品卫生监督管理部门、食品检验部门需要增强对于食品检
社会工作专业人才服务边远贫困地区、边疆民族地区和革命老区计划(以下简称“三区”计划),是党中央、国务院作出的重要决策部署,是国家扶贫开发战略特别是人才扶贫、社会扶贫
期刊
问:项目成效与项目团队成员的执行力有很大关系,尽管我们团队团结友好、互帮互助,工作也积极主动,但是项目整体成效不显著,如何有效地对项目进行运营管理一直困扰着我.rn答:
期刊
“特别感谢社区志愿服务队和爱心企业的帮助,现在感觉日子有了盼头,孩子能好好读书,我也要努力工作,日子总会一天比一天好.”葛莲芝说.rn52岁的葛莲芝是内蒙古乌海市海勃湾区
期刊
“社会工作于我而言,不只是一份职业,更是一种责任.”入行十余年,李长洪对这句话的体会越来越深.也因着这份责任,她为精神障碍患者、困境儿童、高龄老人、贫困家庭等困难群体
期刊
8年时间,选派7700名社会工作者,投入资金1.9亿元,深入近300个贫困县(市、区),培养4000多名社会工作人才,服务人群超500万人次……2012年,民政部组织实施边远贫困地区、边疆民
期刊
三年前,54岁的胡日沁毕力格受内蒙古团委委派,启程前往兴安盟扎赉特旗胡尔勒镇诺勒嘎查,开始为期两年的扶贫工作.作为内蒙古师范大学青年政治学院社会工作与社会管理系的教授
期刊
目的? 研究银杏叶胶囊联合尼可地尔用药对冠状动脉粥样硬化心脏病心绞痛的临床治疗效果.方法? 本院选取90例冠心病心绞痛患者作为研究对象,将90例患者随机分配为观察组患者45
近年来,在各级党委、政府及社工界的不懈努力下,我国城乡社会工作呈现良好发展势头.广东先行先试,2010年着手建立家庭综合服务中心、社区党群服务中心、社区综合服务中心等,
期刊
蔬菜安全关系着每个人的身体健康,因此对于有机磷农药的检测要提高检测质量和水平,在检测之前根据不同种类的有机磷农药元素选择合适的检测方法,提高检测的精准度.并且对于不