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心脏死亡后器官捐献(donation after cardiac death,DCD)肝移植受者术后并发症发生率增加,且生存率降低;器官获取过程中热缺血时间(warm ischemia time,WIT)延长,引起供肝严重的缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)。近期研究表明内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在 IRI 中发挥重要作用,而ERS与DCD供肝损伤的关联性仍然未知。本研究以大鼠DCD肝移植模型为基础,探讨ERS在DCD肝移植中的作用,并近一步针对ERS改良供肝保存方法,探讨新方法对大鼠DCD肝移植预后的影响。第一部分目的:研究ERS在DCD肝移植中的激活情况及牛磺熊脱氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TUDCA)和 4-苯基丁酸(4-phenyl butyric acid,PBA)在该模型中对 ERS的抑制效果。方法:大鼠肝移植模型分为以下四组:1.1组:对照组,正常肝移植手术,供肝 WIT<1 min;1.2 组 DCD 组,供肝 WIT = 60 min;1.3 组:TUDCA组,供者术前腹腔注射TUDCA(100 mg/kg体重),其余操作同1.2组;1.4组:PBA组,供着术前腹腔注射PBA(100 mg/kg体重),其余操作同1.2组。术后检查血清转氨酶浓度、氧化应激激活情况及肝脏ERS相关蛋白表达水平;进行肝脏病理学检查并观察生存曲线。结果:相较于1.1组,1.2组术后转氨酶浓度及氧化应激水平显著性升高,肝脏病理损伤严重,ERS信号相关蛋白表达显著升高,所有大鼠3天之内死亡;1.3组及1.4组转氨酶浓度、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和 8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)比1.2组显著降低,超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性升高,病理损伤减轻,ERS信号受到抑制,受者存活率显著性增加。结论:ERS参与DCD肝移植术后肝脏损伤过程,术前对供者大鼠腹腔注射TUDCA或PBA有助于减轻肝脏损伤,改善预后。第二部分目的:研究向器官保存液(UW液)中添加TUDCA或PBA并联合持续低温氧合灌注系统(continuous hypothermic oxygenation perfusion system,CHOPS)保存 DCD 供肝的可行性。方法:全部供肝分为以下九组:2.1组:对照组,非DCD供肝,低温静态保存;2.2组:DCD组,DCD供肝,低温静态保存;2.3组:CHOPS组,DCD供肝,CHOPS 保存供肝,保存液为 UW 液;2.4-2.6 组:CHOPS+TUDCA(25、50 和100 mg/L)组,DCD供肝,CHOPS保存供肝,保存液为分别添加不同浓度的TUDCA 的 UW 液;2.7-2.9 组:CHOPS+PBA(25、50 和 100 mg/L)组,DCD供肝,CHOPS保存供肝,保存液为分别添加不同浓度的PBA的UW液。检测保存6小时后保存液转氨酶水平及供肝病理损伤。结果:含有中剂量(50 mg/L)TUDCA或PBA的UW液联合CHOPS保存供肝显著性降低保存液中转氨酶浓度,减轻供肝病理损伤。结论:联合应用CHOPS和改良UW液(含中剂量TUDCA或PBA)保存供肝可显著减轻供肝冷缺血损伤,且效果优于单用CHOPS。第三部分目的:研究CHOPS联合改良UW液保存供肝对大鼠DCD肝移植预后的影响。方法:所有大鼠肝移植模型分为以下五组:3.1组:对照组,正常肝移植手术,供肝WIT<1min,低温静态保存,保存液为UW液;3.2组:DCD组,供肝WIT = 60 min,低温静态保存,保存液为UW液;3.3组:CHOPS组,供肝WIT = 60 min,应用CHOPS保存,保存液为UW液;3.4组:TUDCA组,保存液添加TUDCA(50mg/L),其余操作同3.3组;3.5组:PBA组,保存液添加PBA(50 mg/L),其余操作同3.3组。术后检测大鼠血清转氨酶浓度及氧化应激激活水平,评估肝脏病理损伤并观察生存期。结果:相较于3.2组,3.3组受者血清转氨酶浓度及氧化应激损伤水平均显著性降低,供肝病理损伤减轻,生存率提高;这种改善作用在3.4组和3.5组两组进一步得到增强。结论:CHOPS联合应用TUDCA或PBA改良的UW液保存DCD供肝显著减轻术后受者肝脏损伤,保证良好的术后生存率。