新疆棉花黄萎病拮抗放线菌的筛选鉴定及其防效研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:haiwei2009
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目的:筛选出对棉花黄萎病菌具有较强抑制活性的拮抗放线菌,并对拮抗菌进行初步的分类鉴定,最后通过盆栽试验对菌株防治效果做初步研究。方法:对新疆地区棉花病害发生情况进行统计,采集10株棉花黄萎病病样,分离棉花黄萎病病原菌,并采用形态学及生物学方法进行鉴定。同时从新疆地区各棉区采用五点采样法采集土样24份,以高氏一号培养基为培养基制,采用平板稀释法从不同土样中分离放线菌;以棉花黄萎病菌(Verticilliumdahliae)为供试菌,经平板对峙生长试验,筛选对病原菌具有抑制活性的拮抗菌,测量抑菌圈直径。采用发酵液抑菌活性及发酵液对种子胚根生长影响试验进一步验证拮抗放线菌的生防效果。用改良的SDS法提取拮抗放线菌TD3-2-1基因组DNA,利用细菌16SrDNA扩增通用引物进行PCR扩增,扩增产物测序后进行Blast比对,结合形态学、生理生化特征对TD3-2-1进行鉴定。通过盆栽试验对拮抗菌的防治效果做进一步研究。结果:1、调查数据显示,新疆地区棉花病害以棉花黄萎病为主,经分离鉴定命名为MJ-XJ的棉花黄萎病菌为大丽轮枝菌(Verticilliumdahliae)。2、分离获得561株放线菌,经平板对峙试验获得101株对棉花黄萎病原菌具有抑制作用的拮抗放线菌,其中抑菌圈直径大于15mm的拮抗菌29株。3、拮抗放线菌在平板对峙试验和发酵液抑菌活性试验均表现出较强的抑菌活性,其TD3-2-1发酵液抑菌活性测定数据显示该菌株对病原菌的菌丝生长抑制率为58.5%。4、基于TD3-2-1的形态结构、培养特征、生理生化特性及16SrDNA序列分析,将其初步鉴定为链霉菌(Streptomycessp.)。5、种子萌发试验表明,放线菌TD3-2-1菌株对棉花的种子具有明显的促生作用。经拮抗菌TD3-2-1处理过的棉花黄萎病发病率和病情指数均明显降低。结论:经筛选获得了一株对棉花黄萎病具有明显抑制作用的拮抗放线菌,离体及活体试验表明抑菌作用稳定性良好,经鉴定为Streptomycessp.。TD3-2-1对棉花黄萎病具有很好的生防潜质。
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