目的:建立脾虚水湿不化大鼠模型,观察黄芪及拆分组分(黄酮组分、皂苷组分、多糖组分、水提物组分)对脾虚水湿不化模型大鼠一般状况、胃肠功能、水液代谢及血清蛋白、血脂的影响,探讨黄芪性味药理学物质基础。应用大鼠全基因表达谱芯片检测黄芪及拆分组分对脾虚水湿不化模型大鼠十二指肠基因表达的影响,从功能基因组角度初步探讨黄芪性味物质基础及健脾祛湿的分子机制,为中药性味理论研究提供依据。方法:1.模拟中医甘肥过度、劳倦内伤的病因,采用高脂低蛋白饮食加力竭游泳法建立脾虚水湿不化大鼠模型,通过体重、自主活动、胃肠功能、水液代谢、血清蛋白、血脂等反映脾虚及水湿不化的相关指标进行模型评价。2.采用酶联免疫、酶法、组织形态学等方法检测黄芪及拆分组分对脾虚水湿不化大鼠血清胃泌素含量、尿D木糖排泄率、胃排空率及小肠推进率、水负荷指数、血清蛋白含量、血脂含量及十二指肠组织形态学的影响,探讨黄芪性味药理学功效及物质基础。3.采用全基因表达谱芯片研究各组大鼠十二指肠组织基因表达状况,筛选差异表达基因,进行基因聚类分析,应用Fun Net网络分析工具对差异表达基因进行基因本体分析和信号通路分析,探讨脾虚水湿不化大鼠脾失健运的分子机制及黄芪及拆分组分健脾祛湿的分子机制。4.采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠十二指肠组织Reg1a、Aqp5、Trpm6、Tff2 m RNA表达,验证基因芯片结果的可靠性。结果:1.与对照组比,模型大鼠一般状况变差,体重显著降低、自主活动次数减少、血清胃泌素含量及尿D木糖排泄率降低(P<0.01,P<0.05),水负荷指数增加(P<0.01),尿量减少(P<0.01),血清总蛋白、白蛋白、球蛋白降低(P<0.01,P<0.05),血清胆固醇及低密度脂蛋白增加(P<0.01),血清高密度脂蛋白减少(P<0.05)。2.与模型组比,黄芪及拆分组分均可不同程度改善模型大鼠一般状况,增加体重,增加血清胃泌素含量(P<0.05,P<0.01),改善肠粘膜形态;水煎液组、黄酮组、多糖组、水提物组可增加模型大鼠自主活动次数(P<0.05,P<0.01);水煎液组、多糖组均可增加尿D-木糖排泄率、胃排空率及小肠推进率(P<0.05,P<0.01),黄酮组可增加胃排空率及小肠推进率(P<0.05,P<0.01),皂苷组可增加尿D-木糖排泄率(P<0.05);黄芪及拆分组分各组均可降低水负荷指数,增加尿量(P<0.05,P<0.01);水煎液组、多糖组和水提物组可升高血清总蛋白、球蛋白、高密度脂蛋白,降低总胆固醇和低密度脂蛋白(P<0.05,P<0.01),黄酮组可升高高密度脂蛋白、降低总胆固醇和低密度脂蛋白(P<0.05),皂苷组可升高高密度脂蛋白(P<0.05)。3.基因芯片结果显示,脾虚水湿不化大鼠有1275条基因表达水平发生改变,和模型组比较,黄芪水煎液组有688条,黄酮组有1204条,皂苷组有1361条,多糖组有3181条,水提物组有2419条基因表达水平发生改变,各给药组共同差异基因有92条。脾虚水湿不化发生机制与消化减弱、物质转运障碍、氨基酸代谢异常、免疫功能降低有关。黄芪及拆分组分可调控与水液代谢、物质消化吸收(蛋白质、矿物质及脂肪)、物质代谢(丝氨酸、甘氨酸,精氨酸、脯氨酸,亚油酸及花生四烯酸)、免疫等途径相关基因的表达,发挥健脾益气祛湿的功效。实时荧光定量PCR结果显示,检测基因的表达量与芯片检测结果一致,验证了芯片结果的可靠性。结论:脾虚水湿不化模型大鼠体现了脾虚水湿不化的病理特点,与临床特征基本相符。黄芪及拆分组分可改善脾虚水湿不化模型大鼠脾失健运状况,发挥健脾祛湿的治疗作用,其分子机制为调控水液代谢、物质消化吸收、物质代谢、免疫等。黄芪性味物质基础主要为多糖组分,黄酮、皂苷、多糖、水提物组分也发挥部分治疗作用。