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目的:探讨中枢胆碱能系统在应激条件下对颈动脉窦压力感受器反射(Carotid sinus baroreceptor reflex, CSR)的影响及其可能的调节机制。方法:选择SD大鼠于应激态(足底随机电击,每次2小时,一天二次,持续一周,经应激标准筛选后用于实验)和常态下(处理、环境与应激态相同,但装置不通电,进行假应激),分别孤离其双侧颈动脉窦区(保留窦神经,切断主动脉神经和迷走神经),使之独立于体循环,同时在胆碱能纤维投射、受体分布的脑区之一:孤束核(NTS)和侧脑室,分别微量注射各种药物:人工脑脊液(ACSF)或选择性胆碱能受体拮抗剂(M1受体拮抗剂pirenzepine, PRZ或M2受体拮抗剂methoctramine, MTR或N1受体拮抗剂hexamethonium, HEX),以非应激常态下侧脑室或NTS注射ACSF后的CSR水平和应激态下侧脑室或NTS注射ACSF后的CSR水平分别作为实验的阴性对照组和阳性对照组。将不同窦内压(ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic五参数曲线方程拟合,构建二者函数关系,根据所得ISP-MAP关系曲线、ISP-增益(Gain)关系曲线以及CSR系列特征参数(均为实验的观察指标),解析应激条件下中枢胆碱能系统对CSR的调制作用及其机制。结果:1.应激对CSR的影响在非应激组和应激组中,分别侧脑室或NTS内注射ACSF前、后,各自CSR水平和基础血压水平均无明显变化,实验以非应激常态下侧脑室或NTS注射ACSF后的CSR水平和应激态下侧脑室或NTS注射ACSF后的CSR水平分别作为实验的阴性对照组和阳性对照组。与非应激基础CSR水平及阴性对照组CSR水平相比,应激基础CSR水平及阳性对照组CSR水平共同表现为:ISP-MAP关系曲线显著全面右上移位(P<0.05),ISP-Gain关系曲线中部明显下移(P<0.05),CSR机能参数调定点(Set Point)、饱和压(SP)和最大增益时窦内压(ISPGmax)明显升高(P<0.05),而反射最大增益(Gmax)和平均动脉压反射变动范围(MAP range)显著减小(P<0.05)。2.侧脑室微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响及其与非应激对照水平的比较2.1侧脑室微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对非应激CSR的影响在非应激组分别侧脑室注射(intracerebroventricular injection, i. c. v.)M1受体拮抗剂PRZ或M2受体拮抗剂MTR或N1受体拮抗剂HEX,均不引起各自ISP-MAP、ISP-Gain关系曲线和反射系列参数明显改变(P>0.05)。2.2侧脑室微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响在应激组i. c. v.同非应激组相应剂量的PRZ或MTR后,均能不同程度的减弱应激对CSR的抑制性重调定,表现为:与阳性对照组相比,应激PRZ、MTR组各自ISP-MAP关系曲线后半程显著下移(P<0.05),ISP-Gain关系曲线中部明显上移(P<0.05),饱和压SP和最大增益时的窦内压值ISPGmax下降(P<0.05),反射最大增益Gmax及MAP反射变动范围MAP range加大(MTR组)(P<0.05);就缓解应激对CSR抑制的程度而言,MTR的缓解作用强于PRZ的作用,表现为ISP-Gain关系曲线中部明显上移(P<0.05),饱和压SP和最大增益时的窦内压值ISPGmax下降(P<0.05),反射最大增益Gmax及MAP反射变动范围MAP range增多(P<0.05),上述反应一般出现在应激组i.c.v. PRZ或MTR后15至20 min,可维持15 min左右。但应激HEX组则对应激所致CSR的变化没有明显影响(P>0.05),却与PRZ组、MTR组的效应相比,有着不同程度的显著差异(P<0.05)。2.3侧脑室注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响与非应激对照水平的比较侧脑室微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂PRZ或MTR,均不能使应激的CSR水平完全恢复到相应的非应激对照水平(P<0.05)。3. NTS微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响及其与非应激对照水平的比较3.1 NTS微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对非应激CSR的影响在非应激组分别NTS注射M1受体拮抗剂PRZ或M2受体拮抗剂MTR或N1受体拮抗剂HEX,也均不引起各自ISP-MAP、ISP-Gain关系曲线和反射系列参数明显改变(P>0.05)。3.2 NTS微量注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响在应激组NTS注射同非应激组相应剂量的PRZ或MTR后,同样均能不同程度的减弱应激对CSR的抑制性重调定,表现为:与阳性对照组相比,应激PRZ、MTR组各自ISP-MAP关系曲线后半程显著下移(P<0.05),ISP-Gain关系曲线中部明显上移(P<0.05),反射参数调定点Set Point(MTR组)、饱和压SP和最大增益时的窦内压值ISPGmax下降(P<0.05),反射最大增益Gmax及MAP反射变动范围MAP range加大(MTR组)(P<0.05);就缓解应激对CSR抑制的程度而言,MTR的缓解作用依然强于PRZ的作用,表现为其ISP-MAP关系曲线后半程显著下移(P<0.05),ISP-Gain关系曲线中部明显上移(P<0.05),反射最大增益Gmax及MAP反射变动范围MAP range加大(P<0.05),上述变化一般出现在应激组NTS注射PRZ或MTR后12 min,也可维持20 min左右。但应激HEX组则对应激所致CSR的变化没有明显影响(P>0.05),却与PRZ组、MTR组的效应相比,有着不同程度的显著差异(P<0.05)。3.3 NTS注射不同胆碱能受体拮抗剂对应激所致CSR变化的影响与非应激对照水平的比较NTS微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂PRZ或MTR,均不能使应激的CSR水平完全恢复至相应的非应激对照水平(P<0.05)。结论:1.应激引起颈动脉窦压力感受器反射(CSR)重调定,反射敏感性下降,反射机能受抑。2.非应激常态下,在侧脑室或NTS分别微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂(M1受体拮抗剂PRZ或M2受体拮抗剂MTR或N1受体拮抗剂HEX),均不引起各自基础动脉血压水平的明显改变,也不影响CSR反射的敏感性和机能。3.侧脑室微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂PRZ(M1受体拮抗剂)或MTR(M2受体拮抗剂),可明显减弱应激对CSR的抑制性重调定;而M2受体拮抗剂的缓解作用大于M1受体拮抗剂;N1受体拮抗剂则无明显作用。提示室周核团的M1、M2受体尤为M2受体参与介导应激对CSR的抑制性重调定。4. NTS内微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂PRZ(M1受体拮抗剂)或MTR(M2受体拮抗剂),对应激所致CSR重调定的影响与结论3类似,NTS处M2受体拮抗剂的缓解作用大于M1受体;N1受体拮抗剂则同样无明显作用。提示NTS的M1、M2受体尤为M2受体也参与介导应激对CSR的抑制性重调定,下丘脑-NTS的胆碱能通路可能是应激影响CSR机能的下行通路之一。5.侧脑室或NTS微量注射所给剂量的选择性胆碱能受体拮抗剂PRZ或MTR后,均不能使应激的CSR水平完全恢复到相应的非应激对照水平。表明除了中枢胆碱能系统参与应激对CSR的抑制机制外,尚有其他神经机制的参与作用。