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本研究分为二部分：
第一部分：MAPKs信号通路在HHPV中的作用及三七总皂苷干预(离体肺动脉环灌流实验)
目的：研究MAPKs信号通路在低氧高二氧化碳性肺动脉收缩(HHPV)中的作用；探讨三七总皂苷防治HHPV的机制及与MAPKs信号通路的关系。
方法：制备离体SD大鼠肺主动脉环、二级肺动脉环。分别观察肺主动脉环、二级肺动脉环在常氧及急性低氧高二氧化碳介质中(PO2=30-35mmHg，PCO2=55.60mmHg)的张力变化；在急性低氧高二氧化碳条件下分别用ERK1/2上游激酶抑制剂U0126、P38MAPK通路抑制剂SB203580以及三七总皂苷(PNS)孵育二级肺动脉，观察各自对低氧高二氧化碳性肺动脉收缩的影响；急性低氧高二氧化碳条件下用PNS+SB203580、PNS+U0126联合孵育二级肺动脉环，观察MAPKs通路抑制剂SB203580和U0126对PNS血管舒张作用的影响。
结果：①在常氧条件下，肺主动脉、二级肺动脉张力均无明显变化；②急性低氧高二氧化碳条件下二级肺动脉发生双向性收缩反应即：Ⅰ期快速收缩峰、Ⅰ期舒张、Ⅱ期持续收缩(和常氧组相比P＜0.05)：肺主动脉只在低氧高二氧化碳早期出现较明显的收缩峰，后期则变化不明显(和常氧组相比P＞0.05)；③低氧高二氧化碳条件下，二级肺动脉分别用U0126、SB203580孵育后，Ⅱ期持续收缩幅度明显下降(P＜0.05)，Ⅰ期快速收缩峰、Ⅰ期舒张均没有明显变化(P＞0.05)；④低氧高二氧化碳条件下，PNS可明显减轻HHPV的Ⅰ期快速收缩峰和Ⅱ期持续收缩幅度(和单纯低氧高二氧化碳组相比P＜0.05)。用PNS+SB203580、PNS+U0126联合孵育二级肺动脉环，发现MAPKs通路抑制剂SB203580和U0126能增强低氧高二氧化碳条件下PNS的血管舒张作用(P＜0.05或P＜0.01)。
结论：
1.在离体条件下，急性低氧高二氧化碳(PO2=30-35mmHg，PCO2=55-60mmHg)可使肺主动脉出现早期快速收缩，并可使二级肺动脉环发生双向性收缩反应；
2.急性低氧高二氧化碳条件下，U0126、SB203580均能减弱二级肺动脉环的Ⅱ期持续收缩反应。这提示MAPKs信号通路参与了二级肺动脉双向性收缩反应的Ⅱ期收缩。
3.PNS可减轻低氧高二氧化碳性肺血管收缩：U0126、SB203580增强PNS引起的血管舒张。说明PNS和MAPKs信号通路抑制剂在减轻HHPV时具有协同作用；抑制P38MAPK、ERK1/2通路能增强PNS的血管舒张作用。
第二部分：MAPKs信号通路在HHPH中的作用及三七总皂苷干预(大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压实验)
目的：研究MAPKs信号通路在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压(HHPH)发生发展中的作用：探讨三七总皂苷防治HHPH的机制及与MAPKs信号通路的关系。
方法：①慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠模型复制：雄性SD大鼠72只(体重200～220g)，随机分成6组(n=12)，即正常组(N)，低氧高二氧化碳3天组(H3d)、1周组(H1w)、2周组(H2w)、4周组(H4w)和血塞通治疗组(Hp)。将后五组大鼠放入常压低氧高二氧化碳舱内，舱内氧气浓度维持在9％～11％，二氧化碳浓度维持在5％～6％(舱内水蒸汽用无水CaCl2吸收，多余二氧化碳用氢氧化钠吸收)，每天8小时，每周6天。Hp组于每日进舱前半小时腹腔注射血塞通注射液(50mg·kg-1·d-1)，其余各组大鼠腹腔注射等量生理盐水。N组置于舱外，自由呼吸空气，其他组饲养条件相同。在低氧高二氧化碳3天、1周、2周、4周(PNS组4周)及正常组用右心导管法测量平均肺动脉压(mPAP)，颈总动脉插管测量平均颈动脉压(mCAP)，分别称取右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV+S)重量；HE染色测量肺细小动脉管壁面积/管总面积[(WA/TA)％]。以mPAP、mCAP、RV/(LV+S)％、(WA/TA)％作为判断模型建立成功的指标。②western印迹法、免疫组织化学技术检测肺组织及肺血管p-P38、p-ERK、P38、ERK蛋白的表达。
结果：①H1w组mPAP为(35.26±2.04)mmHg，与N组比较差异有统计学意义(P＜0.05)：H2w组大鼠mPAP、RV/(LV+S)％及(WA/TA)％分别为(16.85±0.88)mmHg、(30.19±0.95)％和(44.10±2.29)％，与N组(11.00±0.62)mmHg、(23.41±0.97)％和(28.71±2.56)％]比较差异均有统计学意义(P均＜0.05)：H4w组稳定于高水平；上述指标n3d组与N组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05)说明低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠模型复制成功。②肺组织p-ERK蛋白在N组表达不明显，在H3d组表达上升为0.313±0.042，与N组(0.018±0.003)比较差异有统计学意义(P＜0.05)，且在H1w、H2w、H4w组均高水平表达，较N组差异有统计学意义(P＜0.05)。H4w组p-ERK蛋白(0.217±0.03)较H2w组(0.358±0.043)表达减低(P＜0.05)。③肺组织p-P38蛋白在N组表达不明显，在H3d组表达上升为0.225±0.071，与N组(0.012±0.006)比较差异有统计学意义(P＜0.05)，且在H1w、H2w、H4w组均有高水平表达。④肺小动脉壁p-ERK蛋白在N组表达呈弱阳性或阴性，H3d组表达上升为0.133±0.018与N组(0.107±0.016)比较差异有统计学意义(P＜0.05)；在H1w、H2w、H4w组表达水平逐渐升高，较N组差异有统计学意义(P＜0.05)。⑤肺小动脉壁p-P38蛋白在N组和H3d组表达呈阴性或弱阳性，在H1w组表达上升为0.124±0.025，与N组(0.099±0.015)比较差异有统计学意义(P＜0.05)，在H2w、H4w组有高水平表达，较N组差异有统计学意义(P＜0.05)。⑥PNS组肺组织p-P38、p-ERK蛋白，肺小动脉壁p-P38、p-ERK蛋白表达较低氧高二氧化碳4周组均降低(P＜0.05)，下降比例分别为75.59％、53.02％、84.86％和87.33％。
结论：MAPKs信号通路介导了低氧高二氧化碳性肺动脉高压的形成。PNS可能通过抑制P38MAPKs、ERK1/2通路来减轻低氧高二氧化碳性肺动脉高压的形成。