皮肤癣菌的分子生物学鉴定和毛发穿孔试验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xie2372
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目的:皮肤癣菌是浅部真菌病的主要病原菌,主要侵犯皮肤、毛发及指(趾)甲,寄生或腐生于表皮角质、毛发和甲板的角蛋白组织中。目前已报告的有45种,其中一部分仅感染动物,而对人类有致病作用的约20余种。常引起感染的皮肤癣菌主要有须癣毛癣菌、红色毛癣菌、犬小孢子菌、铁锈色小孢子菌、絮状表皮癣菌。本研究对临床常见的皮肤癣菌的3个属5种皮肤癣菌进行AP-PCR研究,旨在探讨其分子生物学鉴定和分型的意义,并在光镜和电镜下观察须癣毛癣菌和犬小孢子菌对毛发破坏的程度,比较其对不同年龄组毛发感染时间的差异。方法:皮肤癣菌菌株采集自河北医科大学第四医院皮肤科门诊浅部真菌病患者,均经过培养及形态学和生化鉴定。以氯化苄法抽提菌株基因组DNA,采用任意引物AP3、ATG、TCA和TCT对临床常见的皮肤癣菌:须癣毛癣菌、红色毛癣菌、犬小孢子菌、铁锈色小孢子菌、絮状表皮癣菌的基因组DNA进行扩增,对各病原菌的DNA指纹的特征进行分析。毛发穿孔试验是取4个年龄组的毛发(小于2岁、2~13岁、14~19岁、大于20岁)分别置于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基,然后在各年龄组毛发上分别接种犬小孢子菌和须癣毛癣菌菌悬液3~5滴,置于27℃温箱培养,在接种后3天开始每隔一天取数根毛发分别进行光镜和电镜观察,以了解犬小孢子菌和须癣毛癣菌形态学上的差异以及受感染毛发的结构变化。
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