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目的:以平性祛风湿中药秦艽为基本药,分别与威灵仙、桑寄生、防己配伍,组成平温（秦艽配伍威灵仙）、平平（秦艽配伍桑寄生）、平寒（秦艽配伍防己）的配伍关系,观察秦艽寒热不同配伍药对对风寒湿痹类风湿关节炎（RA）模型大鼠踝关节核因子κB（NF-κB）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响,通过比较秦艽及其寒热不同配伍药对的疗效,进一步探讨药性-疾病-药效之间的关系。方法:80只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、疾病模型组、风寒湿病证模型组（Ⅱ型胶原注射加风寒湿环境刺激）、阳性药组、单味秦艽组、秦威组（秦艽配伍威灵仙）、秦桑组（秦艽配伍桑寄生）、秦防组（秦艽配伍防己）,每组10只。实验第1天,取大鼠背部脊柱两侧2点及尾根部1点,共三处,剃毛;除空白组,各组大鼠各点皮内注射Ⅱ型胶原乳剂0.1 mL,共0.3 mL;第12天,除空白组,各组大鼠在左后足跖皮内注射Ⅱ型胶原乳剂0.1 mL做二次免疫;空白组在相同时间、相同位置注射同体积的注射用水。自初次注射Ⅱ型胶原乳剂次日开始,除空白组与疾病模型组外,其余各组均用改装后的智能人工气候箱对大鼠做风寒湿环境刺激用以制备病证结合的风寒湿痹RA大鼠模型。风寒湿环境条件:温度4℃,风速5 m·s-1,相对湿度≥95%,并将大鼠足跖没入0℃冰水混合液中。1次/天,30 min/次,连续18天。造模结束后,各中药组按25 g·kg-1给予相应药液,阳性药组按6 mg·kg-1给予雷公藤多苷混悬液,其余组给予等量生理盐水,1天1次,连续21天。实验过程中,每天观察各组大鼠毛发、精神状况、二便等一般状态;每3天测量1次大鼠体质量并记录;每3天测量1次大鼠左后足跖厚度并记录,计算足跖肿胀度。实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数（AI）评分。实验第39天,末次给药1 h后,大鼠腹主动脉取血5 mL,静置2 h后,离心(3000 r·min-1,15 min),取血清,用ELISA试剂盒检测大鼠血清中类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、白介素-6（IL-6）含量。每组取4只大鼠的左后踝关节,4%多聚甲醛固定,HE染色,电镜下观察踝关节病理学改变,免疫组化法检测各组大鼠踝关节NF-κB、VEGF、MMP-3、TIMP-1的积分光密度值（IOD值）;每组取3只大鼠的左后踝关节,-80℃保存,采用蛋白免疫印迹技术（WB）检测各组大鼠踝关节NF-κB、VEGF、MMP-3、TIMP-1蛋白表达量;取3只大鼠的左后踝关节,-80℃保存,实时荧光定量PCR技术（RT-PCR）检测各组大鼠踝关节NF-κBmRNA、VEGF mRNA、MMP-3mRNA、TIMP-1mRNA表达量。结果:1.一般状态观察实验过程中,空白组大鼠较活跃,体质量增加快。各造模组大鼠经二次加强免疫后,活动明显减少,喜侧卧,左后足跖肿胀明显,左后足跖皮肤触之柔软,呈紫红色,发热明显,个别大鼠出现蜕皮现象或四肢肿胀,体质量增加缓慢。经治疗后,各给药组大鼠活动增加,足跖肿胀均有不同程度减小,左后足跖颜色由紫红色逐渐恢复为正常肤色,体质量逐渐增加,而疾病模型组及病证模型组未见明显改善。2.足跖肿胀度及AI评分结果与空白组比较,疾病模型组及病证模型组足跖肿胀度、AI评分明显升高（P<0.01）;与病证模型组比较,各给药组足跖肿胀度、AI评分明显降低（P<0.05,P<0.01）,各中药组中以秦威组降低最明显。3.组织病理学结果疾病模型组软骨组织结构严重破坏,软骨细胞排列疏松,少量软骨细胞核固缩凋亡,大量炎细胞浸润,大量新生血管生成,关节面严重破损;病证模型组在疾病模型组病理改变基础上关节腔内存在大量纤维物渗出,滑膜细胞增生,部分滑膜细胞呈绒毛状增生突入关节腔内,关节表面粗糙;各治疗组大鼠踝关节软骨组织结构破坏减少,少量炎细胞浸润,新生血管生成减少,关节面破损有不同程度恢复。4.NF-κB表达结果与空白组比较,疾病模型组及病证模型组大鼠踝关节NF-κB的IOD值、NF-κB蛋白表达水平及NF-κBmRNA水平明显升高（P<0.01）;与病证模型组比较,各给药组NF-κB的IOD值、蛋白表达水平及基因表达水平均有所降低;各中药组组间比较,秦威组大鼠踝关节NF-κB的IOD值明显降低（P<0.01）,NF-κB蛋白表达水平明显低于单味秦艽组（P<0.05）,NF-κBmRNA水平明显低于秦桑组及秦防组（P<0.01）。5.VEGF表达结果与空白组比较,疾病模型组及病证模型组大鼠踝关节VEGF的IOD值、VEGF蛋白表达水平及VEGFmRNA水平明显升高（P<0.01）;与病证模型组比较,各给药组VEGF的IOD值、蛋白表达水平及基因表达水平均有不同程度降低;各中药组组间比较,秦威组大鼠踝关节VEGF的IOD值明显降低（P<0.01）,VEGF蛋白表达水平明显低于单味秦艽组及秦桑组（P<0.01或P<0.05）,VEGFmRNA水平明显降低（P<0.01）。6.MMP-3和TIMP-1表达结果与空白组比较,疾病模型组及病证模型组大鼠踝关节MMP-3的IOD值、MMP-3蛋白表达水平及MMP-3mRNA水平明显升高（P<0.01）,踝关节TIMP-1的IOD值、TIMP-1蛋白表达水平及TIMP-1mRNA水平显著降低（P<0.01）。与病证模型组比较,各给药组踝关节MMP-3的IOD值、蛋白表达水平及基因表达水平均明显降低（P<0.01）;阳性对照组、秦威组及秦桑组大鼠踝关节TIMP-1的IOD值、蛋白表达水平及基因表达水平均有所升高（P<0.01）。各中药组组间比较,秦威组大鼠踝关节MMP-3的IOD值明显降低（P<0.01）,MMP-3蛋白表达水平明显低于单味秦艽组（P<0.01）,MMP-3mRNA表达水平差异不明显（P>0.05）;秦威组大鼠踝关节TIMP-1的IOD值、TIMP-1蛋白表达水平及TIMP-1mRNA水平明显升高（P<0.01）。7.血清学检测结果与空白组比较,疾病模型组及病证模型组大鼠血清RF、CRP、IL-6水平明显升高（P<0.01）;与病证模型组比较,各给药组血清RF、CRP、IL-6水平均有所降低。各中药组组间比较,秦威组大鼠血清RF水平低于单味秦艽组及秦防组（P<0.05）,血清CRP、IL-6水平差异不明显（P>0.05）。结论:秦艽及各配伍组对风寒湿痹RA大鼠均有一定治疗效果,其中以秦威组的治疗效果最好,可明显减轻大鼠足跖肿胀,减少大鼠软骨细胞核固缩凋亡及新生血管,显著降低NF-κB、VEGF的表达,下调MMP-3与TIMP-1的比值,减轻软骨破坏。中药配伍治疗风寒湿痹RA大鼠的疗效趋势为:秦威组>秦桑组>单味秦艽组>秦防组。平温相配的秦威组的治疗效果优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,提示对于寒性疾病,应给予热性药物治疗会取得更好的治疗效果,实验结果与中医“疗寒以热药”、“寒者热之”的治疗原则基本相符。该配伍治疗风寒湿痹型RA的机制可能与其可以减少NF-κB、VEGF、MMP-3的表达水平,升高TIMP-1的表达,降低血清RF、CRP、IL-6水平,减轻关节软骨破坏,减少新生血管有关。